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请教关于MTT脾淋巴细胞增殖问题
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| Sample TextSample Text我做脾淋巴细胞增殖实验,无菌取脾,细胞浓度为2*10e6个/ml,96孔板,每孔100μL细胞,加入10μLConA(不同浓度)孵育72小时后,加入MTT(5mg/ml)再孵育4个小时,没有出现甲瓒结晶,在显微镜下观察,细胞还是透亮的,没有发生任何变化。我又做了一次试验,取完脾细胞,孵育20小时,直接加MTT,孵育4h,有甲瓒结晶,但是很少,而且细胞还是透亮的。我想请教各位,脾细胞在96孔板里,死细胞和活细胞怎么区分啊?我那细胞都是透亮的。还有我加入MTT没有甲瓒结晶,能说明我的细胞全部死亡了吗(MTT我用其他细胞验证过,没有问题)?非常感谢各位的回答! |
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