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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 大肠杆菌连接转化假阳性很多
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一氧化氮

新虫 (初入文坛)

[求助] 大肠杆菌连接转化假阳性很多

大肠杆菌连接转化之后长出的大部分都是假阳性，出现这种情况的原因都有哪些啊？
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1楼 2012-05-10 21:31:08
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 专家考核 2012-05-11 13:41:37
抗生素失效或浓度过低，载体酶切不完全或自连，宿主有污染，等等。
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2楼2012-05-11 08:05:56
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一氧化氮

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lxj341401 at 2012-05-11 08:05:56:
抗生素失效或浓度过低，载体酶切不完全或自连，宿主有污染，等等。

我们用的是蓝白斑筛选，挑选的白斑都是空载的，出现这种情况最主要的原因是什么啊？
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3楼2012-05-11 19:48:25
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zhangyke

新虫 (初入文坛)
试剂失效了没有？
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4楼2012-05-11 20:04:20
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一氧化氮

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by zhangyke at 2012-05-11 20:04:20:
试剂失效了没有？

应该没有，蓝白斑显色很明显，但是挑选的白斑金星菌落pcr扩出来的都是空载带
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5楼2012-05-12 20:54:13
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我是小纯洁

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我想，是你的片段太稀了，导致连上载体的片段就少，当然假阳性多了
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6楼2012-05-13 11:34:06
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