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c3024034

银虫 (正式写手)

[求助] 抗体检测的问题

为什么有的抗体只检测内源蛋白无法检测外源性蛋白?
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

基于Ediman降解法的蛋白质自动测序仪不能直接测出共价的氨基酸残基,用质谱仪可以直接测定出共价的氨基酸残基,不过用质谱仪测序比较贵,你可以用胰蛋白酶或胰凝乳蛋白质酶切割内源和外源的同种蛋白质,用用质谱仪测定出各个肽段的分子量,加以比较可知道修饰位点大致在那里,然后对该段肽段测定修饰位点和类型,可用质谱,也可用化学方法。
9楼2012-05-23 16:57:01
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-05-18 15:31:16
某种抗体识别的是抗原上的特定的抗原免疫簇--------包括顺序抗原免疫簇和空间抗原免疫簇,没有抗原免疫簇就不会有抗体-抗原的专一性结合,这与蛋白质来源无关。
2楼2012-05-18 12:14:54
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c3024034

银虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 凌波丽 at 2012-05-18 12:14:54:
某种抗体识别的是抗原上的特定的抗原免疫簇--------包括顺序抗原免疫簇和空间抗原免疫簇,没有抗原免疫簇就不会有抗体-抗原的专一性结合,这与蛋白质来源无关。

但我们买的一个抗体为什么只能检测内源的呢?而我们转染进去表达的蛋白却无法检测,同一种蛋白
3楼2012-05-20 15:45:59
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖


小丹木木: 金币+1, 辛苦 2012-05-22 13:49:11
这就是你表达的蛋白质有问题,或者被共价修饰了,包括加了或减了有关的基团,而阻碍抗体靠近,或者引起了不正确的折叠,改变了抗原表位。
4楼2012-05-20 19:32:38
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