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c3024034

银虫 (正式写手)

[求助] 抗体检测的问题

为什么有的抗体只检测内源蛋白无法检测外源性蛋白?
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

引用回帖:
5楼: Originally posted by c3024034 at 2012-05-22 10:48:12:
在做WESTERN的时候,蛋白被煮了后,应该不存在折叠或共价修饰了吧?基因我们去测序也是没问题的

你用MS测定两者的相对分子量,可以区别出是否存在共价修饰:用紫外和红外测定两者光谱,可以大致看看是否有二级和三级结构改变。
8楼2012-05-22 21:10:57
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-05-18 15:31:16
某种抗体识别的是抗原上的特定的抗原免疫簇--------包括顺序抗原免疫簇和空间抗原免疫簇,没有抗原免疫簇就不会有抗体-抗原的专一性结合,这与蛋白质来源无关。
2楼2012-05-18 12:14:54
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c3024034

银虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 凌波丽 at 2012-05-18 12:14:54:
某种抗体识别的是抗原上的特定的抗原免疫簇--------包括顺序抗原免疫簇和空间抗原免疫簇,没有抗原免疫簇就不会有抗体-抗原的专一性结合,这与蛋白质来源无关。

但我们买的一个抗体为什么只能检测内源的呢?而我们转染进去表达的蛋白却无法检测,同一种蛋白
3楼2012-05-20 15:45:59
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖


小丹木木: 金币+1, 辛苦 2012-05-22 13:49:11
这就是你表达的蛋白质有问题,或者被共价修饰了,包括加了或减了有关的基团,而阻碍抗体靠近,或者引起了不正确的折叠,改变了抗原表位。
4楼2012-05-20 19:32:38
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