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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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2010020170

金虫 (小有名气)

[求助] 高效液相色谱 关于有关物质的分离

前几天刚把含量测定做完,这几天在做有关物质的检查,可是发现不管用哪个比例,两种物质都不能很好的分开,求高人指点。
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  • 2012-05-04 09:03:55, 40.5 K

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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
2010020170: 金币+10 2012-05-06 08:45:59
引用回帖:
6楼: Originally posted by 2010020170 at 2012-05-04 15:20:18:
我的标准品里面有两个物质,要求用适合的比例分开,分离度要求达到2以上,可是我用乙腈浓度为55%、 45%时就有一个主峰,用40%以下的乙腈浓度时,总是分不开,我想问问大家是我的柱子的问题,还是流动相的问题,有 ...

所以建议走梯度试试,以50%磷酸盐-50%乙腈体系开始,到65%-35%(或70%-30%)止,先看看效果。并适度的调控流动相pH。如果分离度还不满意,或还是以上情况,建议更换色谱柱。
守候在风中的宁静。
8楼2012-05-04 15:46:10
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普通回帖

痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
mouse103: 金币+3, 谢谢参与 2012-05-04 09:46:06
2010020170: 金币+10 2012-05-06 08:45:24
后面两个怎么裂峰了?第一个放大后有这种情况吗?是色谱柱不行了还是本来就有两个东西,没分开啊?

色谱柱问题
1、色谱柱再生
2、色谱柱更换

色谱条件问题
1、可以试试走梯度,磷酸盐从50%至65%,0~10min
2、磷酸盐用5%磷酸调控流动相pH
3、柱温30℃、35℃、40℃调试一下
守候在风中的宁静。
2楼2012-05-04 09:18:46
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dlp2000

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
zhoudeli: 金币+1, 多谢参与 2012-05-04 09:59:58
啦啦啦啦
3楼2012-05-04 09:47:36
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yp3181321

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
从头开始: 金币+1, 鼓励讨论 2012-05-04 17:02:13
2楼磷酸盐走梯度?
我是不是看错了,磷酸盐从50%至65%,0~10min,这个比例走的话,盐析出在柱子里面更分不开,直接就毁柱子了
4楼2012-05-04 13:28:08
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shihao611

禁虫 (知名作家)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
从头开始: 金币+1, 感谢参与 2012-05-04 17:02:20
2010020170: 金币+10 2012-05-06 08:45:38
本帖内容被屏蔽

5楼2012-05-04 13:57:27
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2010020170

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 痴夷子皮 at 2012-05-04 09:18:46:
后面两个怎么裂峰了?第一个放大后有这种情况吗?是色谱柱不行了还是本来就有两个东西,没分开啊?

色谱柱问题
1、色谱柱再生
2、色谱柱更换

色谱条件问题
1、可以试试走梯度,磷酸盐从50%至65%, ...

我的标准品里面有两个物质,要求用适合的比例分开,分离度要求达到2以上,可是我用乙腈浓度为55%、 45%时就有一个主峰,用40%以下的乙腈浓度时,总是分不开,我想问问大家是我的柱子的问题,还是流动相的问题,有没有什么更好的办法。
让自己活得精彩
6楼2012-05-04 15:20:18
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2010020170

金虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by shihao611 at 2012-05-04 13:57:27:
主要是色谱柱和流动相比列的问题
不行就更换色谱柱 调整流动相和比例

我的柱子刚换不久应该是没问题的,比例的话用乙腈浓度45%时是一个峰,40%以下的比例就会有两个峰了,但是没有分开,想问问有什么好的办法吗
让自己活得精彩
7楼2012-05-04 15:22:46
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foxcl

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
6楼: Originally posted by 2010020170 at 2012-05-04 15:20:18:
我的标准品里面有两个物质,要求用适合的比例分开,分离度要求达到2以上,可是我用乙腈浓度为55%、 45%时就有一个主峰,用40%以下的乙腈浓度时,总是分不开,我想问问大家是我的柱子的问题,还是流动相的问题,有 ...

不是柱子问题,主要还是流动相比例的问题,可以结合柱温一起来测试一下。
9楼2012-05-04 22:02:21
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foxcl

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
2010020170: 金币+10 2012-05-06 08:46:14
引用回帖:
7楼: Originally posted by 2010020170 at 2012-05-04 15:22:46:
我的柱子刚换不久应该是没问题的,比例的话用乙腈浓度45%时是一个峰,40%以下的比例就会有两个峰了,但是没有分开,想问问有什么好的办法吗

哪种类型的物质?
流动相成分必须得是这样吗?
试试更低乙腈比例。根据你的图谱,峰2物质在乙腈中没有峰3溶解度大啊。
10楼2012-05-04 22:07:01
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