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T4l连接问题！！
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目前，T4连接遇到问题，老连不上，体系如下： T4 1μL PBI101-GFP 2μL(浓度10ng/μL) 片段 6μL(浓度50ng/μL) 10x Buffer 1μL 12℃ 过夜，感受态JM109 正常， 请大虾们帮助，卡在这了，五个基因一个也没构成，急死了！！ Sample Text |
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atlanticwi
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【答案】应助回帖
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嗯............ 最好先验证下T4是否还好，T4的Buffer中含有的ATP很容易在冻融过程中降解导致连接失败，所以T4的Buffer都是推荐分装使用，并且在冰上化融的，请楼主注意哦 你可以先拿个已知质粒做酶切后，用T4连接看是否可行，若能够连接的话，问题就不是你的T4上咯，应该是你的片段切口和质粒切口对不上的 祝实验顺利 若有说错请高手指点哦  |
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fly12365
2楼2012-04-30 23:40:03
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jingdejun
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sayaya
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