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T4l连接问题！！
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目前，T4连接遇到问题，老连不上，体系如下： T4 1μL PBI101-GFP 2μL(浓度10ng/μL) 片段 6μL(浓度50ng/μL) 10x Buffer 1μL 12℃ 过夜，感受态JM109 正常， 请大虾们帮助，卡在这了，五个基因一个也没构成，急死了！！ Sample Text |
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jingdejun
铁杆木虫 (小有名气)
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7楼2012-05-02 15:18:23
atlanticwi
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【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
fly12365: 金币+3, ★有帮助 2012-05-01 08:53:59
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-05-02 13:36:49
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嗯............ 最好先验证下T4是否还好，T4的Buffer中含有的ATP很容易在冻融过程中降解导致连接失败，所以T4的Buffer都是推荐分装使用，并且在冰上化融的，请楼主注意哦 你可以先拿个已知质粒做酶切后，用T4连接看是否可行，若能够连接的话，问题就不是你的T4上咯，应该是你的片段切口和质粒切口对不上的 祝实验顺利 若有说错请高手指点哦  |
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fly12365
2楼2012-04-30 23:40:03
3楼2012-05-01 03:34:46
4楼2012-05-01 08:38:11
