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孙启亮

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
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小丹木木: 金币+3, 应助指数+1, 专家考核, 辛苦 2012-04-27 13:55:47
西瓜: 金币+3, MolEPI+1, 专家考核, Good!还是要努力提高一下RNA浓度。 2012-04-29 09:23:15
影响,因为你提的RNA无论是否是使用试剂盒,里面都会有有机溶剂什么的,这些有机溶剂都可能是逆转录的抑制剂,你这么低的浓度是不能用于逆转录的。
楼主逆转录之后要PCR吧,试剂盒上可能会说浓度像你这么低就可以用。但他们想表达的不是这个意思,PCR是很敏感的,这么低的浓度确实能检测出来,但前提是在没有抑制剂的情况下。他们所说的RNA浓度,是指提取之后浓度很高然后稀释到100ng,你这个原始浓度都没有达到很高,体系里面存在的逆转录试剂是PCR的抑制剂,所以是不能用的。
国内有很多人做胚胎干细胞,他们的细胞个数只有32,用专用的试剂盒提取到的RNA浓度虽然很低,但是他们的RNA就可以用于PCR,如果你的是普通的细胞,这么低的浓度是不能使用的。
3楼2012-04-27 10:12:28
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