9楼: Originally posted by danyzj01 at 2012-04-27 20:47:01:
对了，后上传的第二张图中，左边和右边用的是不同的染料，左边第一个是粗提DNA，第二个是PCR产物，右边也是如此

另外，MARKER最小的那条100BP的带那里好像隐约还有一排什么条带，是污染吗？还是

10楼: Originally posted by 西瓜 at 2012-04-27 21:09:19:
那PCR应该是ok了。你的EB是加在胶里的吧？EB在电场中，移动的方向跟DNA相反，也就是向着样品孔。所以经过一段时间电泳之后，胶的下半部分EB含量就少了，所以看起来就黑一些。

11楼: Originally posted by 西瓜 at 2012-04-27 21:12:18:
100bp左右是剩余的没有进到产物里面的引物。引物虽然是单链，但是会 形成局部二级结构，也是可以被染色的。另外也可能是引物二聚体。这种现象是很常见的，几乎每次PCR都会有，不用太介意的。

14楼: Originally posted by honinglee at 2012-04-27 21:50:25:
基本上确定是扩增出东西来了。但是不是你需要的目的条带就不得而知了。楼主可以多扩增几个循环，产物量大一些，回收后连个T载测个序看看是不是你要的就知道了。条带大小1800左右？2000bp的那张图的PCR扩增条带和6 ...

16楼: Originally posted by liangxiuyan at 2012-04-28 08:36:43:
按原理来说，应当确定你要的提取基因片段大小，然后根据marker才能确定成功与否

18楼: Originally posted by liangxiuyan at 2012-04-29 08:25:19:
引物二聚体多，一个是设计问题，还有就是加的量比较大，可以摸索一下浓度。也可以提高退火温度试试

17楼: Originally posted by danyzj01 at 2012-04-28 21:46:26:
将PCR产物直接进行第二次PCR，结果引物剩那么多，是怎么回事？
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