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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 这样的电泳图片是否代表PCR扩增成功了？
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danyzj01

银虫 (正式写手)

[求助] 这样的电泳图片是否代表PCR扩增成功了？

这是提取DNA后粗跑的电泳，1%胶，30min

提取DNA后粗跑的电泳，2%胶，30min

PCR后跑的电泳，2%胶，30min

提取DNA后粗跑的电泳，1%胶，30min



提取DNA后粗跑的电泳，2%胶，30min



PCR后跑的电泳，2%胶，30min
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1楼2012-04-26 21:29:29
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★ ★
小丹木木: 金币+2, 西瓜斑斑W5 2012-04-27 11:57:25
你的maker条带是多大的？PCR条带看起来跟粗提的DNA条带位置差不多……楼主最好把你提的DNA以及PCR产物放在一张图上。而且maker选得也不合适，条带都没在maker范围内呢。
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3楼2012-04-26 21:55:55
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
PCR产物应该有多大？提的是基因组DNA吗？
产物的带很亮也很特异，大小对的话应该就是啦。
今天有事，明天再关注啦
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5楼2012-04-26 22:09:59
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

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8楼: Originally posted by danyzj01 at 2012-04-27 20:44:34:
以下这两张图，MARKER左边的是粗提的DNA，右边是PCR后，第一张是600BP的MARKER，第二张是2000BP的，但是拍照的仪器出了点问题，下半部分完全笼罩在黑暗中，不知道是什么原因？
44/cc/1725610_1335530652_143.jpg ...

那PCR应该是ok了。你的EB是加在胶里的吧？EB在电场中，移动的方向跟DNA相反，也就是向着样品孔。所以经过一段时间电泳之后，胶的下半部分EB含量就少了，所以看起来就黑一些。
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10楼2012-04-27 21:09:19
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 继续W5 2012-04-28 09:28:24
引用回帖:
9楼: Originally posted by danyzj01 at 2012-04-27 20:47:01:
对了，后上传的第二张图中，左边和右边用的是不同的染料，左边第一个是粗提DNA，第二个是PCR产物，右边也是如此

另外，MARKER最小的那条100BP的带那里好像隐约还有一排什么条带，是污染吗？还是

100bp左右是剩余的没有进到产物里面的引物。引物虽然是单链，但是会 形成局部二级结构，也是可以被染色的。另外也可能是引物二聚体。这种现象是很常见的，几乎每次PCR都会有，不用太介意的。
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11楼2012-04-27 21:12:18
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
引用回帖:
12楼: Originally posted by danyzj01 at 2012-04-27 21:36:47:
是GOLDEN VIEW，应该都是一样的吧，那就不是仪器的镜头脏什么的吧

差不多的。你的仪器没问题，放心吧。
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24楼2012-04-29 17:29:43
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
引用回帖:
22楼: Originally posted by danyzj01 at 2012-04-29 14:51:31:
2%的胶很好配，不稠，而且不容易破

我确实是新手，但是你生来就会？也许你说的大部分是对的，但不代表你没有说错，请不要会一点东西就装！

楼主别急啊，虫友也没有恶意嘛。实验慢慢做就好啦。2%的胶也可以用，不过稍微有点浪费，琼脂糖也便宜呢。1%的胶适合范围很大，以后熟练了可以试试1%的吧。祝实验顺利哈~
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25楼2012-04-29 17:35:41
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