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consist10

金虫 (正式写手)

应助: 0 (幼儿园)
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散金: 86
帖子: 729
在线: 187小时
虫号: 634640
注册: 2008-10-23
专业: 黏膜免疫疾病

[求助] 怎么分离分子伴侣和目的蛋白

如题，HPV16 L1 蛋白带有GST标签，此融合蛋白分子量为82kd, 但和分子量为60kd的GroEL 分子伴侣结合在一起，请问亲们该如何分离呢？按照文献里说的使用ATP和氯化镁，尿素的方法，融合蛋白和分子伴侣总是同时成为沉淀，愁死了，请教大家啊！

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1楼 2012-04-24 17:14:27

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to-be

金虫 (正式写手)

MolEPI: 5
应助: 29 (小学生)
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在线: 70.6小时
虫号: 254873
注册: 2006-05-27
性别: MM
专业: 神经生物学

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
consist10: 金币+3, ★有帮助, 邮箱mfl0729@126.com，疏水性蛋白没做过，仅做过GST和几丁质纯化。 2012-04-25 16:48:42

引用回帖:

6楼: Originally posted by consist10 at 2012-04-25 09:01:55:
分子伴侣和目的蛋白是结合在一起的，过分子筛的话是要将其一起变性才能将分子伴侣和目的蛋白分开的，因为复性的效率低，我不想变性啊。你说的加入结合分子伴侣的蛋白，具体是怎么做的呀？能否把文献发给我借鉴一 ...

QQ或邮箱给我说下。
By the way,楼主有没有做过疏水性蛋白？