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小酒窝7988

银虫 (小有名气)

[求助] 液相色谱峰问题

我用流动相(55%甲醇)溶解样品峰形就很好,如下图1所示:
用甲醇溶解样品进样会出现肩峰,如下图2所示:
但是积分出来的峰面积是一样大的,本来以为峰形不好无法定量的,这是为什么呢???????由于我要提取东西进样检测,但是我提取的物质只能溶解在甲醇里面,用流动相溶解会出现乳化现象,所以我想问,怎么才可以让他在用甲醇溶解的情况下也出现良好的峰形?

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lily5289

捐助贵宾 (小有名气)

【答案】应助回帖

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小酒窝7988: 金币+4 2012-04-26 10:29:43
这个应该是溶剂极性过小造成的,楼主可以在甲醇里少加点水试试,纯甲醇溶解峰型就这样了,没法改善。
2楼2012-04-23 16:03:29
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

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soundhorizo: 金币+2, 感谢,辛苦啦 2012-04-23 21:06:16
小酒窝7988: 金币+3 2012-04-26 10:29:47
如果只用甲醇溶解,可以试试升高一点柱温,但不一定有效,而且保留时间会提前。也可以试试通过流速调整。

如果使用水-甲醇体系,可以使用缓冲盐么?或者在稀释液(样品溶解液)中加入微量的盐,或许可以促进破乳化。
守候在风中的宁静。
3楼2012-04-23 16:12:23
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ltxin2009

铁杆木虫 (职业作家)

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小酒窝7988: 金币+1 2012-04-26 10:24:53
甲醇溶解,再用流动相稀释2.5倍,进样量增加2.5倍。
7楼2012-04-23 21:10:44
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普通回帖

xf000963

新虫 (初入文坛)

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小酒窝7988: 金币+1, 你的说法不对,但是谢谢帮顶 2012-04-26 10:25:29
哈哈,可能是柱子堵了,拆下筛板超声一下就OK了!
4楼2012-04-23 17:02:08
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martina123

木虫 (小有名气)

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小酒窝7988: 金币+1, 这样不好,富集倍数会变小 2012-04-26 10:25:56
要不就多称一倍的样品,用甲醇溶解之后过滤,然后稀释一倍,用水定容??
5楼2012-04-23 20:42:02
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hoho2010

金虫 (正式写手)

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soundhorizo: 金币+2, 感谢应助 欢迎常来分析版交流指导^^ 2012-04-23 21:06:36
小酒窝7988: 金币+1, 稀释太多,会影响富集倍数以及检出限 2012-04-26 10:26:37
1、能否用气相测试?
2、将用甲醇溶解的样品,用流动相稀释10-100倍。若还有乳化现象,可以考虑加入微量NaCl破乳。
好好学习,天天向上。
6楼2012-04-23 20:59:42
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zhouhaoa

木虫 (小有名气)

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小酒窝7988: 金币+1 2012-04-26 10:27:03
主要还是要解决样品在甲醇-水体系中的溶解性问题。除了可以尝试升高柱温、在甲醇溶解的样品中加入少量的水外,可以考虑降低一点样品的浓度看看峰型是否会有改善。
8楼2012-04-24 00:54:03
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ABCzero

至尊木虫 (正式写手)

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小酒窝7988: 金币+1, 流动相溶解会乳化 2012-04-26 10:27:21
溶剂效应吧,很多时候用纯水或者纯甲醇溶解样品会出现这个情况。最好用流动相起始配比的溶液溶液样品
9楼2012-04-24 08:43:15
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小酒窝7988

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lily5289 at 2012-04-23 16:03:29:
这个应该是溶剂极性过小造成的,楼主可以在甲醇里少加点水试试,纯甲醇溶解峰型就这样了,没法改善。

我觉得就是你说的原因导致的,加少量水不引起乳化的情况下,还是不好看的峰,在当溶剂的甲醇-水系统中加入少量盐还是会乳化,又不敢多加,怕进色谱不好
10楼2012-04-25 10:02:08
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