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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 质量控制 » 高效液相峰型问题
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2010020170

金虫 (小有名气)

[求助] 高效液相峰型问题

求大家帮忙 我在做化药含量测定 可是按我的条件 为什么出现的峰型会是这样的呢 换了几个比例都是这样 求各位高手指点 是什么原因？用的流动相是磷酸盐缓冲液和乙腈 C8的色谱柱
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    • 2012-04-15 15:29:46, 19.5 K

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让自己活得精彩
1楼 2012-04-15 15:32:34
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

liuzibing518

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

让出峰时间延长一些，看看行不行，反相的话，流动相极性越大，，出峰越慢，出峰时间也就延长了，刚才打错了，应该是减少乙腈的比例，增加缓冲盐的比例，试试看！
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11楼2012-04-15 21:53:13
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普通回帖

woshiyang

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
lk590: 金币+1, 谢谢参与 2012-04-15 16:20:48
2010020170: 金币+15, ★★★很有帮助 2012-04-15 21:12:07
有2个可能的原因：
1、色谱柱不适合检测该样品
2、样品里含有的杂质跟样品极性差别太小，无法达到分离要求
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2楼2012-04-15 15:53:09
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飞翔之鹰

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
lk590: 金币+1, 谢谢参与 2012-04-15 16:20:57
2010020170: 金币+10, ★有帮助 2012-04-15 21:11:49
样品不纯，建议重结晶后再试试
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失败是成功之母？？？？？？？？
3楼2012-04-15 16:01:44
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lyliang
4楼2012-04-15 16:24:31
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wangfei.ac

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zhoudeli: 金币+1, 欢迎参与 2012-04-15 17:55:47
2010020170: 金币+15, ★★★很有帮助 2012-04-15 21:11:33
峰形挺好的，条件可以再摸索一下：梯度升的再慢些，保留时间适当再延长。要是主次峰的UV不一样，那就是混有一个杂质了。
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5楼2012-04-15 17:32:11
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liuzibing518

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zhychen2008: 金币+1, 感谢回帖交流 2012-04-15 20:06:30
2010020170: 金币+15, ★★★很有帮助 2012-04-15 21:11:18
应该是样品还有一个杂质峰未分开，造成的拖尾现象，先将样品精制一下，再做一下，看看是否拖尾：如果还是拖尾的话，换一根柱子试一试，看看能否将拖尾峰分开；还可以将流动相中乙腈比例稍微调高一点试一试，让出峰时间再晚一点，看看能否分开。
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6楼2012-04-15 18:07:10
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2010020170

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by liuzibing518 at 2012-04-15 18:07:10:
应该是样品还有一个杂质峰未分开，造成的拖尾现象，先将样品精制一下，再做一下，看看是否拖尾：如果还是拖尾的话，换一根柱子试一试，看看能否将拖尾峰分开；还可以将流动相中乙腈比例稍微调高一点试一试，让出峰 ...

应该不是有杂质 我用的是标准品 之前用65:35的比例 后来用60:40的 但是还是不行 虽然改善点 但是峰型还是不好 还有我想问 提高乙腈的比例 怎么延长出峰时间啊？
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让自己活得精彩
7楼2012-04-15 21:06:51
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2010020170

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by woshiyang at 2012-04-15 15:53:09:
有2个可能的原因：
1、色谱柱不适合检测该样品
2、样品里含有的杂质跟样品极性差别太小，无法达到分离要求

之前 也用的这个比例 峰型很好 可是一天后再做就出现这种情况了 是什么原因呢
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让自己活得精彩
8楼2012-04-15 21:08:38
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2010020170

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by wangfei.ac at 2012-04-15 17:32:11:
峰形挺好的，条件可以再摸索一下：梯度升的再慢些，保留时间适当再延长。要是主次峰的UV不一样，那就是混有一个杂质了。

提高乙腈的量 怎么延长保留时间啊  我之前做的时候 乙腈量增加的时候保留时间提前啊
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让自己活得精彩
9楼2012-04-15 21:10:41
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joseph8432

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
mouse103: 金币+1, 谢谢参与 2012-04-16 08:46:50
我看了下，峰形基本上还可以，只是后面有点拖尾，鉴于之前是好好的，有可能柱温的影响，你用的什么柱温箱，一体的，还是外置的，外置的一般跟室温有很大的温差，不容易控制住
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10楼2012-04-15 21:14:09
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