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menglinyan

新虫 (小有名气)

[求助] 帮我看看这张电泳图中存在的问题

我最近在做RAPD,半个月了,没有条带,几乎都是这样的。急死我了,谁能帮帮我啊!!!
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sunyan1129

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我也要做RAPD,是25ul体系的,但是跑出来的带有点弥散掉了,只要一个有很清楚地带…… 想交流一下,谢谢
还是在原地……fighting!!!!
7楼2012-05-17 16:57:26
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menglinyan

新虫 (小有名气)

没人理我啊,,,刚才检测又是白板,我的模板浓度和引物浓度都降低了,还是跑不出来。RAPD有那么难做的吗!
2楼2012-04-15 18:16:20
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wskxbxf

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by menglinyan at 2012-04-15 18:16:20:
没人理我啊,,,刚才检测又是白板,我的模板浓度和引物浓度都降低了,还是跑不出来。RAPD有那么难做的吗!

楼主 请问您的问题得到解决了吗  我最近也在做RAPD 也是跑胶好多次都跑不出来 电泳结果跟你的不一样 而是什么都没有 求交流啊
3楼2012-05-16 20:38:55
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menglinyan

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wskxbxf at 2012-05-16 20:38:55:
楼主 请问您的问题得到解决了吗  我最近也在做RAPD 也是跑胶好多次都跑不出来 电泳结果跟你的不一样 而是什么都没有 求交流啊

我的已经出来了。最大的问题是,我们用的排管不干净。RAPD不稳定,随机性大,重复性差,所以很容易受污染。后来我换做了一次性的EP管子就出来了。效果还不错,每次都有带。。我先开始做的是15微升体系,后来发现点样的时候会蒸发一些。。你可以用30微升的体系先试试,MIX15,水13,DNA1,引物1。看看有没有带,这个体系比较稳定。。模板必须没有降解啊,如果这些因素都排除了,还是没有出条带,那你可以用其他材料的DNA试试,还不行的话,就是引物的问题了。
4楼2012-05-17 09:40:32
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