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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于免疫荧光核染不上~~跪~急~求~~
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zhangting172

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于免疫荧光核染不上~~跪~急~求~~ 已有1人参与

肾脏免疫荧光，想观察一个蛋白的表达部位，在核还是在胞浆，但是核染色进不去，用了0.3% triton破膜，还是染不上，有什么办法吗~~~急求呀~~~
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    • 2012-04-13 16:20:55, 1.03 M

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1楼 2012-04-13 16:21:21
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resurgam

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

1、多聚甲醛固定
2、triton透化
3、BSA孵育
4、一抗(你确定你加的抗体量是足够的？)
5、二抗(你确定你加的抗体量是足够的？)
6、看荧光

确定你荧光的最大激发光是多大的，万一显微镜达不到最大激发值，光就是很弱的
如果蛋白表达量本身就很弱，普通荧光显微镜可能效果很差，试试看confocal。
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2楼2014-04-08 22:13:30
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