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zhangting172

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于免疫荧光核染不上~~跪~急~求~~ 已有1人参与

肾脏免疫荧光,想观察一个蛋白的表达部位,在核还是在胞浆,但是核染色进不去,用了0.3% triton破膜,还是染不上,有什么办法吗~~~急求呀~~~
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resurgam

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

1、多聚甲醛固定
2、triton透化
3、BSA孵育
4、一抗(你确定你加的抗体量是足够的?)
5、二抗(你确定你加的抗体量是足够的?)
6、看荧光

确定你荧光的最大激发光是多大的,万一显微镜达不到最大激发值,光就是很弱的
如果蛋白表达量本身就很弱,普通荧光显微镜可能效果很差,试试看confocal。
2楼2014-04-08 22:13:30
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