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baby1_9253344

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[求助] 重组质粒丢失一个碱基是否影响表达

如题，欲将外源基因插入PET30a质粒的多酶切位点，表达蛋白。测序后发现在rbs前面的基因处少了个碱基A，别的地方都正常。不知道这样是否会造成错位，影响蛋白表达？
如图，红圈标出位置本应是AAA，但测序结果是AA....前面测序的图挺丑的，不过后面的峰还是挺分明的（见附件），新手，不懂怎么看测序图。求高手解答~~

测序图[ Last edited by baby1_9253344 on 2012-4-10 at 20:13 ]

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附件 1 : 04081171(5)T7_G10.ab1

2012-04-10 20:12:36, 257.25 K

1楼 2012-04-10 19:37:23

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

baby1_9253344

金虫 (小有名气)

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引用回帖:

7楼: Originally posted by zx6291 at 2012-04-11 10:59:05:
（1）建议重新换一家公司测序，有可能是测序的问题。
（2）如果是在ATG上面的话，可以不用再做，应该不影响表达，如果是在你的基因内部的话，应该要造成移码，建议重做。

如图为我使用的载体PET30a，记得坛子里说粗箭头和细箭头分别对应双链里面每一个链的，那么这几个粗箭头应该都是一个方向的，细箭头是另一个方向的，但是这个图谱里f1 origin和kan的细箭头对开...看不懂了就>..

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9楼2012-04-11 11:05:25

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zhaohq1209

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【答案】应助回帖

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telomerase: 金币+2, 辛苦辛苦 2012-04-10 20:56:29
baby1_9253344: 金币+2 2012-04-11 08:22:49
baby1_9253344: 金币+2, 谢谢回复~ 2012-04-11 09:10:21

测序峰图不是很好，可能是测序错误。

如果是缺掉一个碱基，会造成移码突变，只能重做。

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我有一个梦想，我梦想有一天，我们的人民可以根据自己的意愿与消费能力，居住在自己愿意居住的地方。