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weandyouzhy

木虫 (小有名气)

[求助] PCR的引物扩增后会被降解掉吗?

一般的DNA复制完成时,RNA引物会被降解掉。那么在pcr扩增反应中。Taq酶会不会将引物链剪切掉呢?另外,能不能详细的介绍下PCR中所加试剂的量的原因。谢谢了
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weandyouzhy

木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by bbwalkman at 2012-04-07 14:56:00:
应该是不会的,因为在你跑胶的时候会发现在最顶端还是有引物条带存在的,而且Taq酶均具有5'-3'聚合酶活性,但不一定具有3'-5'和5'-3'的外切酶活性。3'-5'外切酶活性可以消除错配,切平末端;5'-3'外切酶活性可以消 ...

谢谢你了!不过我想如果Taq酶能降解引物的话,那么因为引物是过量的,是否也可以使PCR继续进行。不过目的片段的扩增倍数就会很小,是这样吗?我对这方面有些迷惑,见笑了!
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6楼2012-04-07 20:31:18
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weandyouzhy

木虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by bbwalkman at 2012-04-07 20:44:45:
这个Taq酶是耐热聚合酶,应该不会对引物进行降解,一般能降解DNA的,DNase I用的比较多一点呢,这个没什么见笑的啊,大家不都这样过来的嘛

好的,多谢了!
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8楼2012-04-09 11:02:23
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