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求助,real-time PCR 标准样品和部分待测样品,没有CT值已有1人参与
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刚做real-time PCR,遇见了一个大问题,待高手解答,先谢谢了! 我的标准样品和待测样品中的8个,都没有CT值 probe用的是TaqMan PCR 反应溶液组分: DNA 2 uL, 50-150 ng, 260/280 都在1.8-2.1之间, probe: 2 pmol primers: 4 pmol master mix: 10 ul 总共: 20 uL plasmid DNA作为标准DNA模板,待测DNA来于活性污泥,目标DNA是RNA 循环了40次,标准样品都没CT值,10个待测样品,只有两个有CT值 该实验重复了一点,结果类似 我用同样的引物,用没稀释的标准DNA和待测DNA,做个常规PCR,跑胶结果显示目标DNA是扩增了的。 real-time PCR 仪器是:Stratagene Mx3000 可能原因是? |
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孙启亮
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