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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 提总dna的问题
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johnny4890

新虫 (小有名气)

[交流] 提总dna的问题 已有5人参与

提米曲霉的总dna。每次提的dna都在270左右有吸收峰，有时候在260有吸收峰，且有100ng/ul，但跑胶验证却什么也没有，这是怎么回事呀？
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1楼 2012-04-03 15:29:48
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

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只要不影响后续的操作就行。
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2楼2012-04-03 16:40:03
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johnny4890

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by brightfuture01 at 2012-04-03 16:40:03:
只要不影响后续的操作就行。

跑胶都没有带，可以做后续研究吗？
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3楼2012-04-03 21:06:46
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

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3楼: Originally posted by johnny4890 at 2012-04-03 21:06:46:
跑胶都没有带，可以做后续研究吗？

晕，不好意思，我看错你的问题了。你用什么方法提取的真菌DNA？ CTAB法还是试剂盒？ 我怀疑是有多糖残留。但是一点DNA也得不到也太。。。了吧。
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
4楼2012-04-03 21:21:50
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蓝慧

木虫 (正式写手)
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3楼: Originally posted by johnny4890 at 2012-04-03 22:06:46:
跑胶都没有带，可以做后续研究吗？

一般没有带不能做后续吧
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向着目标前进！
5楼2012-04-04 09:31:08
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johnny4890

新虫 (小有名气)
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4楼: Originally posted by brightfuture01 at 2012-04-03 21:21:50:
晕，不好意思，我看错你的问题了。你用什么方法提取的真菌DNA？ CTAB法还是试剂盒？ 我怀疑是有多糖残留。但是一点DNA也得不到也太。。。了吧。

不是ctab也不是试剂盒，大概是液氮-SDS-乙酸钾-氛仿醇-异丙醇-TE。一点都没有，以前提酵母也是用这个方法提都提出来了，现在换霉菌就不行了。
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6楼2012-04-04 09:42:38
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

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6楼: Originally posted by johnny4890 at 2012-04-04 09:42:38:
不是ctab也不是试剂盒，大概是液氮-SDS-乙酸钾-氛仿醇-异丙醇-TE。一点都没有，以前提酵母也是用这个方法提都提出来了，现在换霉菌就不行了。

霉菌的壁比酵母的还是难破很多，也许你这个方法不够剧烈。可以再加一些蜗牛酶之类的。要不就换方法，CTAB挺好用的。
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
7楼2012-04-04 11:11:08
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aoaoshch

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
液氮研磨+CTAB裂解+抽提n次，试试能不能提出来……
祝你顺利。
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8楼2012-04-04 11:35:40
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johnny4890

新虫 (小有名气)
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7楼: Originally posted by brightfuture01 at 2012-04-04 11:11:08:
霉菌的壁比酵母的还是难破很多，也许你这个方法不够剧烈。可以再加一些蜗牛酶之类的。要不就换方法，CTAB挺好用的。

谢谢，我用ctab法做出来了。
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9楼2012-04-04 13:32:39
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johnny4890

新虫 (小有名气)
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8楼: Originally posted by aoaoshch at 2012-04-04 11:35:40:
液氮研磨+CTAB裂解+抽提n次，试试能不能提出来……
祝你顺利。

谢谢，我用ctab法做出来了。
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10楼2012-04-04 13:32:58
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