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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR提取试剂盒不见了，手动配置DNA提取试剂一般都需要准备哪些试剂？
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danyzj01

银虫 (正式写手)

[交流] PCR提取试剂盒不见了，手动配置DNA提取试剂一般都需要准备哪些试剂？ 已有8人参与

请问试剂的名称及其浓度是多少？
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1楼 2012-03-30 20:32:52
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atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
嗯................
是指提基因组DNA吗？为何说是PCR提取试剂盒？是指胶回收盒子？
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Let God do with it as He wills
2楼2012-03-30 20:43:22
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danyzj01

银虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by atlanticwi at 2012-03-30 20:43:22:
嗯................
是指提基因组DNA吗？为何说是PCR提取试剂盒？是指胶回收盒子？

就是DNA模版提取
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3楼2012-03-30 22:59:53
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atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+3, MolEPI+1, 很详细了 2012-03-31 09:37:57
嗯..................
那么是说CTAB法提取DNA吧
那么我贴我自己的方案了:
Reagents:
CTAB Extraction Buffer: 50 mL
2 %(V/V) CTAB--------1.000 g
100mM Tris-Hydrochloric acid(pH 8.0)--------0.605 g
1.4M Sodium chloride--------4.091 g
20mM EDTA•Na2--------0.372 g
Sterilize reagent and store at -4 °C
----------------------------------------------------------------------------------------------------
Wash Buffer: 20 mL
76 % Ethanol--------15.2 mL Anhydrous ethanol
10mM Ammonium acetate--------0.015 g
Distill water--------up to 20 mL

自个有把Protocol翻译成英文的习惯，所以你凑合的看吧，这是用于我们提植物基因组DNA用的，不知是否能用于你的实验
希望有所帮助若有错的话请高手指正
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Let God do with it as He wills
4楼2012-03-30 23:19:17
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yjb3344

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
到底是PCR还是DNA 呢？我是碱裂解法提得动物组织，很便宜 效果也很好 随便买点自己配置就OK了
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不论在世界的任何角落·都要感到幸福
5楼2012-03-31 17:30:59
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可帅儿

银虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西瓜: 金币+1, 有钱银 2012-04-01 17:52:37
我是用磁分离架吸附DNA的方法提取的，不过貌似洗脱液高盐，对PCR后续有影响
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追随自己的心！不要做让自己后悔的事！
6楼2012-04-01 10:51:12
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real-gold

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by 可帅儿 at 2012-04-01 10:51:12:
我是用磁分离架吸附DNA的方法提取的，不过貌似洗脱液高盐，对PCR后续有影响

是用磁珠法试剂盒吗？自配的？
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7楼2012-04-01 19:07:05
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danyzj01

银虫 (正式写手)
这么复杂，我只是提取细菌的DNA，做16SDNA
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8楼2012-04-01 19:13:26
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nnxqwei

至尊木虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by danyzj01 at 2012-04-01 19:13:26:
这么复杂，我只是提取细菌的DNA，做16SDNA

提取细菌的DNA，有质粒DNA或基因组DNA，你做的是16S rDNA，要的是基因组DNA，这和PCR提取试剂盒不见了有什么关系呀？！只有PCR产物纯化试剂盒。唉，思路不清哦。。。
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9楼2012-04-02 08:54:51
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可帅儿

银虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by real-gold at 2012-04-01 19:07:05:
是用磁珠法试剂盒吗？自配的？

不是，买的试剂盒，普洛麦格的~你需要吗？
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追随自己的心！不要做让自己后悔的事！
10楼2012-04-02 20:51:48
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