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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 琼脂糖凝胶电泳
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我是驴

金虫 (小有名气)

[求助] 琼脂糖凝胶电泳

请教各位，我的样品量大约有30μl，要跑琼脂糖凝胶电泳的话需要用哪一个规格的梳子？我要做一小块胶，配多少毫升胶比较合适我这个加样量？
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努力向前
1楼 2012-03-21 16:43:00
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

我是驴

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 大-木-虫 at 2012-03-21 16:53:01:
最小规格的就行呀 煮25到30毫升的胶

这只是样品量，还没算加的loading buffer呢，而且常用规格的那种梳子的最大容量就是37.5μl，感觉有点危险哈。
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努力向前
4楼2012-03-21 16:58:11
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我是驴

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by bbwalkman at 2012-03-21 16:54:34:
你是要把30μl全部上样？还要看你的样品的片段长度是多少

我想通过跑低熔点琼脂糖凝胶电泳来分离纯化二十几Kb的DNA片段，是要把所有样品都加上，而这只是样品量，还没算加的loading buffer呢，而且常用规格的那种梳子的最大容量就是37.5μl，感觉有点危险哈。
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努力向前
5楼2012-03-21 16:59:43
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普通回帖

匿名

用户注销 (正式写手)
★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+1, ID很帅~ 2012-03-21 19:01:18
本帖仅楼主可见
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2楼2012-03-21 16:53:01
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bbwalkman

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你是要把30μl全部上样？还要看你的样品的片段长度是多少
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3楼2012-03-21 16:54:34
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sirius8528

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
我是驴: 金币+2, ★有帮助 2012-03-22 23:58:52
没必要都在一个孔跑啊，而且电泳梳子应该有更大的才对。二十几kb挺大的胶浓度不要太高。
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6楼2012-03-22 15:47:51
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chiden

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你们那电泳槽是什么规格哦。。。
DNA片段大小决定你的胶浓度撒，板子大小决定你用的量多少撒，而且我们这边所谓的最小的梳子做出来的孔都可以加五十唉。。。实在不行分两孔。。。
你这个是DNA纯化还是咋个？
还是检测有没有条带啊。。。
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

我是驴
即使难过，也要微笑着走下去
7楼2012-03-23 14:46:14
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elon_ma

禁言 (初入文坛)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
8楼2012-03-23 16:07:35
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我是驴

金虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by chiden at 2012-03-23 14:46:14:
你们那电泳槽是什么规格哦。。。
DNA片段大小决定你的胶浓度撒，板子大小决定你用的量多少撒，而且我们这边所谓的最小的梳子做出来的孔都可以加五十唉。。。实在不行分两孔。。。
你这个是DNA纯化还是咋个？
还 ...

我是纯化用的，所以加样量较大。
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努力向前
9楼2012-03-23 16:53:13
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跳跳鱼

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
小胶TAE20ml加0.2g琼脂糖配成1%的胶，50微也可以跑，只不过是用可以加50微的梳子，30微没问题
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快乐奋斗，创造所有。
10楼2012-03-23 20:11:28
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