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erty66k

铜虫 (小有名气)

[求助] 乙腈-缓冲盐流动相基线问题

我用A:0.01M辛烷磺酸钠和0.01M磷酸二氢钾(pH=2.5)
    B:乙腈
   梯度是一开始B为27%,到25分钟时为50%,之后是等度50%,
不进样,在40-60分钟的时候有1-4个不等的峰出现,峰形很差,保留时间都不同,整个图很难看!直接走50%等度,基线是平稳的。水是注射用水,乙腈是进口的。这个情况该怎么解决?
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lihuan0525

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
erty66k: 金币+1, 有帮助, 谢谢 2012-03-21 16:45:00
soundhorizo: 金币+3, 感谢应助 欢迎常来分析版交流指导^^ 2012-07-01 09:37:00
1怀疑柱子用完后没有冲洗干净,柱子没有冲洗干净的可能性大
2,乙腈溶液有问题
2楼2012-03-21 16:08:42
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erty66k

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lihuan0525 at 2012-03-21 16:08:42:
1怀疑柱子用完后没有冲洗干净,柱子没有冲洗干净的可能性大
2,乙腈溶液有问题

谢谢,今天我换了一下乙腈,发现有所改善,但还是有点鬼峰!
3楼2012-03-21 16:17:08
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lihuan0525

金虫 (职业作家)

引用回帖:
3楼: Originally posted by erty66k at 2012-03-21 16:17:08:
谢谢,今天我换了一下乙腈,发现有所改善,但还是有点鬼峰!

乙腈有没有做脱气处理啊,没有的话可以超声下,
4楼2012-03-21 16:20:53
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erty66k

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by lihuan0525 at 2012-03-21 16:20:53:
乙腈有没有做脱气处理啊,没有的话可以超声下,

乙腈今天一个上午都在脱气了
5楼2012-03-21 16:24:05
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
erty66k: 金币+1, ★★★很有帮助, 谢谢,明天申购屈臣氏 2012-03-21 17:04:41
soundhorizo: 金币+3, 感谢专家 周末愉快 ^^ 2012-07-01 09:37:25
引用回帖:
3楼: Originally posted by erty66k at 2012-03-21 16:17:08:
谢谢,今天我换了一下乙腈,发现有所改善,但还是有点鬼峰!

含离子对的流动相,若未平衡好,或样品不是使用流动相溶解,很容易产生鬼峰。
守候在风中的宁静。
6楼2012-03-21 16:39:19
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erty66k

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 痴夷子皮 at 2012-03-21 16:39:19:
含离子对的流动相,若未平衡好,或样品不是使用流动相溶解,很容易产生鬼峰。

谢谢回复!我的流动相是A和B,一个水相,一个有机相,走的是梯度,我用什么样的比例作为溶剂比较好?另外如果有机相浓度低了,样品未能完全溶解。我之前用的是A:B=50:50的溶液作为溶剂的!平衡问题可能是的,我再平衡时间长一点试试,还有就是我的流动相是纯乙腈的话会不会有影响,这个是用的别人给我的方法,他们是没有问题的啊!
7楼2012-03-21 16:52:43
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

引用回帖:
7楼: Originally posted by erty66k at 2012-03-21 16:52:43:
谢谢回复!我的流动相是A和B,一个水相,一个有机相,走的是梯度,我用什么样的比例作为溶剂比较好?另外如果有机相浓度低了,样品未能完全溶解。我之前用的是A:B=50:50的溶液作为溶剂的!平衡问题可能是的,我 ...

A:B=50:50的溶液作为溶剂,这个可以。

水是注射用水——用高效液相用水,没有的话,可以用屈臣氏或哇哈哈。
守候在风中的宁静。
8楼2012-03-21 17:01:24
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呵呵zhuzhu

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by erty66k at 2012-03-21 16:52:43:
谢谢回复!我的流动相是A和B,一个水相,一个有机相,走的是梯度,我用什么样的比例作为溶剂比较好?另外如果有机相浓度低了,样品未能完全溶解。我之前用的是A:B=50:50的溶液作为溶剂的!平衡问题可能是的,我 ...

因为之前用过缓冲盐,如果流动相换成纯乙腈时可能会对柱子有点影响,缓冲盐很可能在柱子里结晶,如果是梯度法时用纯乙腈,用完之后应该好好冲洗柱子,避免柱子堵塞或是下次平衡时间过长~~
9楼2012-03-21 21:58:57
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yugijiang

木虫 (著名写手)

楼主厉害呀用离子对试剂做梯度,优化下方法吧,还有做梯度,最好用merck的ACN好(当然要是梯度级的)
10楼2012-07-01 08:25:42
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