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金虫 (小有名气)

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专业: 微生物生理与生物化学

[交流] 硫酸铵分级沉淀已有2人参与

有没有专家帮忙分析一下，硫酸铵分级沉淀后的总蛋白、总酶活、比活力、产率以及纯化倍数怎么求？其中硫酸铵沉淀后的总蛋白和总酶活指的是最后收集的沉淀的，还是在整个过程收集的沉淀？谢谢大家~

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永远不要为失去的感到遗憾——你没有摘到的，只是春天的一朵花，整个春天还是你的。

1楼 2012-03-15 08:54:36

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

冼亮淀粉酶

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生物大分子降解酶

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专业: 环境微生物学
管辖: 微生物

★
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分级沉淀需要得知在不同的饱和度下得到的沉淀物中含有目的物质的比率，是加入硫酸铵（固体或者液体状态皆可）使溶液达到不同的饱和度之后冷藏，离心分离上清液和沉淀，然后继续向上清液中加入硫酸铵使得达到更高的饱和度，重复这个过程。

纯化倍数的计算为用原始酶液的酶活力与蛋白质相除得到的数值1作为100%，每个梯度所得的上清液和沉淀都计算这个比率得到数值2、3、4等等，再除以原始酶液的数值1，得到的比值为纯化倍数。

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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。

3楼2012-03-15 23:22:03