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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 硫酸铵分级沉淀
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分子结构

金虫 (小有名气)

[交流] 硫酸铵分级沉淀 已有2人参与

有没有专家帮忙分析一下，硫酸铵分级沉淀后的总蛋白、总酶活、比活力、产率以及纯化倍数怎么求？其中硫酸铵沉淀后的总蛋白和总酶活指的是最后收集的沉淀的，还是在整个过程收集的沉淀？谢谢大家~
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永远不要为失去的感到遗憾——你没有摘到的，只是春天的一朵花，整个春天还是你的。
1楼 2012-03-15 08:54:36
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zjl01234

银虫 (正式写手)
★
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测总蛋白用lowry法吧，总酶活看你是啥酶了，查不到文献自己定义酶活单位，比活力就是总酶活/总蛋白，产率你用这一步的比上上一步的，纯化倍数就是酶活与上一步相比的数值，如果你只是用盐析提纯的蛋白一般不纯，只是粗提，想用简单的精制方法的话可以结合下等电点沉淀吧
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2楼2012-03-15 22:29:45
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★
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分级沉淀需要得知在不同的饱和度下得到的沉淀物中含有目的物质的比率，是加入硫酸铵（固体或者液体状态皆可）使溶液达到不同的饱和度之后冷藏，离心分离上清液和沉淀，然后继续向上清液中加入硫酸铵使得达到更高的饱和度，重复这个过程。

纯化倍数的计算为用原始酶液的酶活力与蛋白质相除得到的数值1作为100%，每个梯度所得的上清液和沉淀都计算这个比率得到数值2、3、4等等，再除以原始酶液的数值1，得到的比值为纯化倍数。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
3楼2012-03-15 23:22:03
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