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yang20046143

铁虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】液相中进流动相出峰的问题 已有6人参与

Sample Text各位大侠:本人在做HPLC分析的过程中遇到如下问题,希望能得到高手指教,万分感谢!!!
以缓冲盐-乙腈=60:40为流动相平衡柱子(250mm长)后,分三种情况进流动相:
1、配置好的流动相直接进样,约三分钟出出现一个小鼓包,峰高约为0.1;稳定出峰,重现性好。
2、将流动相过0.45微米的有机滤膜进样,约三分钟出现一个峰,峰高为1 ;出峰峰高略有差异。
3、直接从过柱子的流动相瓶子中抽取流动相进样,约三分钟出出现一个小鼓包,峰高约为0.1;稳定出峰,但在重复进样发现有一针出了一个接近于情况2的峰。
百思不得其解,痛苦中... ...
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存在即是被需要
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zoomdoom

银虫 (小有名气)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
karl2100: 金币+1, 3Q 2012-03-29 22:20:45
基线一定要平衡好,你走基线要是也能出峰,说明柱子有残留,就多冲才可以~
平衡好的柱子出现上述情况的几率要小很多,还有就是要确定你上一针样品在柱子里走完了,不能有残留~
做真实的,做最好的!
9楼2012-03-16 11:26:04
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leecius

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5): 给个红包,谢谢回帖
三分钟是你的死体积地方,没保留的都会出峰,你峰大小不一样的可能是有好几种物质。进流动相本该没吸收的,是不是稍微有点气泡的缘故。
心似白云常自在,意如流水任东西。
2楼2012-03-15 08:13:36
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yang20046143

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
: Originally posted by leecius at 2012-03-15 08:13:36:
三分钟是你的死体积地方,没保留的都会出峰,你峰大小不一样的可能是有好几种物质。进流动相本该没吸收的,是不是稍微有点气泡的缘故。

气泡能从哪里引入呢?进样时很小心的应该不会产生气泡才对,还有就是将走柱子的流动相进样时峰很小,一旦再次过膜峰就会变大... ...
存在即是被需要
3楼2012-03-15 10:40:45
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xumiaoyun

铜虫 (小有名气)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
leecius: 金币+1, 谢谢帮助。 2012-03-16 08:48:11
缓冲盐是必须的过滤的,你进样品时候是不是走的梯度条件?梯度变化很大时候也容易产生系统峰,
4楼2012-03-15 13:59:23
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