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二聚体变性后成单体吗?
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淡华云烟
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二聚体变性后成单体吗?
请问:我的蛋白是二聚体,变性后跑SDS凝胶电泳,因为我的蛋白不纯,不知道是看二聚体处的分子量还是看单体处的分子量?求解答!谢谢
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【求助/交流】SDS-PAGE有可能看到蛋白二聚体吗?
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1楼
2012-03-14 10:58:59
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chlorella409
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【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
SDS-PAGE胶跑蛋白是变性的,蛋白成单体
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2楼
2012-03-14 12:07:46
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lxj341401
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【答案】应助回帖
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amisking(金币+2): 鼓励积极应助!
2012-03-14 18:13:52
SDS-PAGE跑出来是亚基分子量,但如果是二硫键形成的二聚体就要看跑的还原胶还是非还原胶,非还原胶还是二体,还原胶是单体。
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3楼
2012-03-14 13:01:23
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楼
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Originally posted by
chlorella409
at 2012-03-14 12:07:46:
SDS-PAGE胶跑蛋白是变性的,蛋白成单体
谢谢!
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4楼
2012-03-14 19:04:32
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楼
:
Originally posted by
lxj341401
at 2012-03-14 13:01:23:
SDS-PAGE跑出来是亚基分子量,但如果是二硫键形成的二聚体就要看跑的还原胶还是非还原胶,非还原胶还是二体,还原胶是单体。
谢谢!!
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5楼
2012-03-14 19:05:22
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mingxie
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【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
SDS-PAGE分还原和非还原,非还原只加SDS,主要是破坏氢键和蛋白质的二三级结构,用来测纯度比较多。如果要测分子量,一般用还原,要加巯基乙醇或者DTT,它们可以破坏二硫键,跑出来的条带就是单体的分子量
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6楼
2012-03-16 13:59:55
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