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淡华云烟

金虫 (小有名气)

[求助] 二聚体变性后成单体吗?

请问:我的蛋白是二聚体,变性后跑SDS凝胶电泳,因为我的蛋白不纯,不知道是看二聚体处的分子量还是看单体处的分子量?求解答!谢谢
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chlorella409

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
SDS-PAGE胶跑蛋白是变性的,蛋白成单体
2楼2012-03-14 12:07:46
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking(金币+2): 鼓励积极应助! 2012-03-14 18:13:52
SDS-PAGE跑出来是亚基分子量,但如果是二硫键形成的二聚体就要看跑的还原胶还是非还原胶,非还原胶还是二体,还原胶是单体。
3楼2012-03-14 13:01:23
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淡华云烟

金虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by chlorella409 at 2012-03-14 12:07:46:
SDS-PAGE胶跑蛋白是变性的,蛋白成单体

谢谢!
4楼2012-03-14 19:04:32
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淡华云烟

金虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by lxj341401 at 2012-03-14 13:01:23:
SDS-PAGE跑出来是亚基分子量,但如果是二硫键形成的二聚体就要看跑的还原胶还是非还原胶,非还原胶还是二体,还原胶是单体。

谢谢!!
5楼2012-03-14 19:05:22
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mingxie

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
SDS-PAGE分还原和非还原,非还原只加SDS,主要是破坏氢键和蛋白质的二三级结构,用来测纯度比较多。如果要测分子量,一般用还原,要加巯基乙醇或者DTT,它们可以破坏二硫键,跑出来的条带就是单体的分子量
6楼2012-03-16 13:59:55
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