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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 综合其他 » 纤维素酶和果胶酶如何配制溶液
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无法体慧

新虫 (初入文坛)

[求助] 纤维素酶和果胶酶如何配制溶液

我想用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞壁，然后做后续实验，不需要培养原生质体，请问酶溶液如何配制？去细胞壁过剩是什么
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1楼 2012-03-13 22:17:40
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

sophiemyn

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
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SongQ5285(金币+4): 鼓励积极应助 2012-03-14 13:09:43
你是观察原生质体吗？用CPW溶液配制就可以，不过要根据你所解离的植物细胞加入一定量的甘露醇保持渗透压，一般都是零点几摩尔的浓度吧，然后加入你需要的纤维素酶和果胶酶的浓度的量即可。至于CPW溶液配制，你只要上网查下就可以，配方很简单。
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2楼2012-03-14 10:01:31
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lengnuan

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by sophiemyn at 2012-03-21 22:03:19:
CPW溶液是无机盐，可以保存一段时间吧，至少半个月可以，长菌或沉淀了就不要用了；酶液无法长期保存，只能现用现配，否则会失去活性。

那加入甘露醇的CPW呢？
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6楼2012-03-22 18:51:28
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robocop

木虫 (著名写手)
引用回帖:
16楼: Originally posted by 844919296 at 2015-08-27 09:56:39
您好，想问一下你配制CPW溶液时是怎么灭菌的呢，是CPW溶液加入纤维素酶、果胶酶，然后过滤灭菌吗？另外酶的用量是多少，还麻烦你指教一下....

CPW就是纯粹的CPW，陪完后放在蓝盖瓶里面高温灭菌。 配酶液的时候，直接在超净工作台里面倒点，然后拿出来溶解酶，完了后，1500 rpm离心15分钟，取上清液，用0.22um微孔滤膜过滤了就可以用了
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纵然我扑倒在地，一颗心依然举着你.晨曦中你拔地而起，我就在你的形象里。
17楼2015-08-27 21:16:15
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普通回帖

无法体慧

新虫 (初入文坛)
★ ★
jhu132llh: 金币+2, 感谢新虫积极应助 2012-03-22 14:45:45
引用回帖:
楼: Originally posted by sophiemyn at 2012-03-14 10:01:31:
你是观察原生质体吗？用CPW溶液配制就可以，不过要根据你所解离的植物细胞加入一定量的甘露醇保持渗透压，一般都是零点几摩尔的浓度吧，然后加入你需要的纤维素酶和果胶酶的浓度的量即可。至于CPW溶液配制，你只要 ...

我不是观察原生质体 是需要去除细胞壁就行
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3楼2012-03-14 21:10:04
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lengnuan

新虫 (初入文坛)
★ ★
jhu132llh: 金币+2, 感谢新虫积极应助 2012-03-22 14:45:52
引用回帖:
2楼: Originally posted by sophiemyn at 2012-03-14 10:01:31:
你是观察原生质体吗？用CPW溶液配制就可以，不过要根据你所解离的植物细胞加入一定量的甘露醇保持渗透压，一般都是零点几摩尔的浓度吧，然后加入你需要的纤维素酶和果胶酶的浓度的量即可。至于CPW溶液配制，你只要 ...

你好，我想请教你一下，加入甘露醇的CPW可以保存多长时间？怎么保存？酶液呢？
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4楼2012-03-21 19:51:01
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sophiemyn

木虫 (著名写手)
★
jhu132llh: 金币+1, 感谢新虫积极应助 2012-03-22 14:45:58
引用回帖:
4楼: Originally posted by lengnuan at 2012-03-21 19:51:01:
你好，我想请教你一下，加入甘露醇的CPW可以保存多长时间？怎么保存？酶液呢？

CPW溶液是无机盐，可以保存一段时间吧，至少半个月可以，长菌或沉淀了就不要用了；酶液无法长期保存，只能现用现配，否则会失去活性。
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5楼2012-03-21 22:03:19
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sophiemyn

木虫 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by lengnuan at 2012-03-22 18:51:28:
那加入甘露醇的CPW呢？

一样的
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7楼2012-03-22 19:38:36
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gzh494266

铜虫 (小有名气)
请教一下，你使用的纤维素酶的终浓度是多少呢？在酶解过程中温度及时间分别多少捏？希望可以指点一下！！
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静心
8楼2012-07-04 14:37:30
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常亚慧

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

用cpw盐配制的纤维素酶不能完全溶解，是因为纤维素酶不纯还是其他原因啊？是否需要加热溶解啊？有人说55℃溶解，酶会失活吗？
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期舞沉沙
9楼2013-06-25 17:07:26
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robocop

木虫 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by lengnuan at 2012-03-22 18:51:28
那加入甘露醇的CPW呢？...

过滤了以后放上大半年都没事。我的6月27配的 到现在还在用，澄清透明得很
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纵然我扑倒在地，一颗心依然举着你.晨曦中你拔地而起，我就在你的形象里。
10楼2013-11-07 11:19:45
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