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lx19880717金虫 (初入文坛)
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[求助]
pET-28a原核不能表达目的蛋白已有2人参与
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我在做原核表达的过程中，使用了pET-28a载体，Rosetta（DE3）表达菌株，但是37℃诱导表达后，连包涵体都没有看到，基本没有任何的蛋白表达，所以想请问一下大家，能不能帮我分析一下是什么原因？谢谢。 PS：我的目的蛋白大量重复序列，是否是由于重复序列导致蛋白在表达过程中无法折叠，如果是这个原因有什么办法可以解决，谢谢。 |
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哈哈，这个我做多了，首先要确定你的克隆是没问题的。关于表达，每个蛋白的表达环境还是有一定差距的，诱导条件有一定的差距，主要是诱导前的细菌OD,一般在细菌的对数生长期，有的蛋白在OD 600为0.6时诱导效果最好，有的在1.0时诱导最好，看你是什么条件， 发自小木虫Android客户端 |
14楼2016-04-03 16:08:28
2楼2012-03-12 16:58:46
lx19880717
金虫 (初入文坛)
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3楼2012-03-12 20:33:16
zhiqiang5070
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4楼2012-03-14 17:49:04