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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » SDS-PAGE胶板为什么下端会出现这些情况
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生命如梭

木虫 (小有名气)

[求助] SDS-PAGE胶板为什么下端会出现这些情况

最近跑胶总是出现问题，请大家赐教
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我有一个梦想，游历各地，走遍世界！
1楼 2012-03-07 10:40:13
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

skpom

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木(金币+3): 鼓励应助，多多交流哦 2012-03-07 16:42:31
生命如梭(金币+2): ★有帮助 我加上Mark看看，杂质的问题请再赐教 2012-03-08 09:33:50
1、你在跑胶前样品离心了没，感觉你的样品杂质好多。
2、你用的什么染色，考马斯亮蓝还是银染。
3、你的蛋白Maker呢，通过Maker条带可更好分析问题出现在什么方面。
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携手共创科技论坛
2楼2012-03-07 14:15:22
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生命如梭

木虫 (小有名气)
西瓜: 回帖置顶 2012-03-21 18:52:40
问题解决，是因为电极缓冲液太少的原因，谢谢大家的帮忙
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我有一个梦想，游历各地，走遍世界！
11楼2012-03-21 10:37:20
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普通回帖

13808906306

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
生命如梭(金币+1): ★有帮助 我用的2乘的，是等体积加的，很多吗？ 2012-03-08 09:34:56
楼主你的蛋白buffer是不是太浓了啊，几乘的啊？少加点
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3楼2012-03-07 14:40:08
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若水5886

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木(金币+3): GOOD！ 2012-03-07 16:44:43
生命如梭(金币+1): ★有帮助 我的胶凝聚时间是50-60min时间不算短吧，我用的是考马斯亮蓝 2012-03-08 09:35:59
1。胶没有凝好，下面条带很弯曲
2。你是用银染吧？下面的小蛋白有点多的样子，染色时间过长了，看到主要条带出来了就立马终止染色。
3。建议加marker，这样出问题的时候也好判断
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4楼2012-03-07 16:08:10
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jbolid

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
生命如梭(金币+1): ★有帮助 我用的是浓缩胶分离胶分别为tris-hcl缓冲液ph6.8和ph8.8的 2012-03-08 09:41:43
西瓜(金币+1): 鼓励 2012-03-08 18:42:38
1、胶没有凝好，同时建议检查制胶的缓冲液的PH是否正确。
2、调整上样量，你的有点过多了。
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5楼2012-03-07 20:23:54
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生命如梭

木虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by skpom at 2012-03-07 14:15:22:
1、你在跑胶前样品离心了没，感觉你的样品杂质好多。
2、你用的什么染色，考马斯亮蓝还是银染。
3、你的蛋白Maker呢，通过Maker条带可更好分析问题出现在什么方面。

用的考马斯亮蓝，样品没有离心，杂质很多从哪些地方看的？谢谢
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我有一个梦想，游历各地，走遍世界！
6楼2012-03-08 09:26:19
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whb21

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+2): 鼓励应助！ 2012-03-08 18:42:54
生命如梭(金币+1): ★有帮助 电泳仪是玻乐的，也没用很久，应该不是这个问题吧，样品量是该调整下 2012-03-09 14:47:13
最后一个跑的还可以吧，条带基本可以看得出来，前两个胶上样量有点大，建议你将蛋白稀释一下再跑胶，第一个图看出胶灌的不怎么均匀导致条带不平行，或者是电泳仪电压不稳，导致的边缘效应。
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7楼2012-03-08 09:44:18
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shicaozhu

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
生命如梭(金币+1): 2012-03-09 14:47:34
点击缓冲液要换了。还有就是高压是不是超过了200V？
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8楼2012-03-08 12:45:03
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生命如梭

木虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by shicaozhu at 2012-03-08 12:45:03:
点击缓冲液要换了。还有就是高压是不是超过了200V？

缓冲液都是新配的，电压是120V
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9楼2012-03-08 14:52:21
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若水5886

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+1): 鼓励！ 2012-03-08 18:43:08
生命如梭(金币+1): ★有帮助 缓冲液是新配的，板是提前洗好的 2012-03-09 14:48:48
生命如梭: 金币+1 2012-03-21 10:39:40
蛋白上样量大了，以至于有些蛋白染色后条带非常深。还有一片模糊的胶，是不是板没有洗干净或者是缓冲液有点脏了？
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10楼2012-03-08 16:23:49
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