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关于G418筛选剂
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嫘诺
新虫
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虫号: 1112858
注册: 2010-10-02
性别:
MM
专业: 植物学
[
求助
]
关于G418筛选剂
本人现在在用G418做筛选剂筛选转基因植株,农杆菌侵染的植物材料为水稻日本晴,表达载体是PROKⅡ,筛选压采用的是25mg/L,两周后加大筛选压改为50mg/L,以后均用50mg/L进行筛选。问题:得到的抗性植株中经分子检测,基因成功转入的几率很小,40棵苗中有1棵,想请教一下各位虫友,这是怎么个情况,是否是用G418做筛选剂,得到的假阳性植株就是很多呢?谢谢。
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1楼
2012-03-05 08:57:43
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木虫
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在线: 136小时
虫号: 180478
注册: 2006-02-09
专业: 作物分子育种
差不多了,能拿到就行了
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2楼
2012-03-05 11:27:09
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sumlg
金虫
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虫号: 1483141
注册: 2011-11-08
专业: 植物生理与生化
【答案】应助回帖
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感谢参与,应助指数 +1
SongQ5285(金币+2): 经验很重要啊 2012-03-05 15:47:19
水稻一般都用潮霉素进行筛选,很早之前就知道G418筛选效果不好,假阳性太高。
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3楼
2012-03-05 13:21:03
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jiaxinfish
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帖子: 981
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虫号: 1308763
注册: 2011-05-28
专业: 生物化学
【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
直接用50mg/L筛,不用25的,先用25的容易产生假的
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4楼
2012-03-06 11:05:38
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