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嫘诺

新虫 (小有名气)

[求助] 关于G418筛选剂

本人现在在用G418做筛选剂筛选转基因植株,农杆菌侵染的植物材料为水稻日本晴,表达载体是PROKⅡ,筛选压采用的是25mg/L,两周后加大筛选压改为50mg/L,以后均用50mg/L进行筛选。问题:得到的抗性植株中经分子检测,基因成功转入的几率很小,40棵苗中有1棵,想请教一下各位虫友,这是怎么个情况,是否是用G418做筛选剂,得到的假阳性植株就是很多呢?谢谢。
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bired

木虫 (著名写手)

差不多了,能拿到就行了
2楼2012-03-05 11:27:09
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sumlg

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
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SongQ5285(金币+2): 经验很重要啊 2012-03-05 15:47:19
水稻一般都用潮霉素进行筛选,很早之前就知道G418筛选效果不好,假阳性太高。
3楼2012-03-05 13:21:03
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jiaxinfish

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
直接用50mg/L筛,不用25的,先用25的容易产生假的
4楼2012-03-06 11:05:38
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