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试剂疑问
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| 请问 1.在什么情况下使用10Xloading buffer,请举例说明一下。 2.TBE和TAB缓冲溶液在用途上有什么差别? 3.什么原因会造成成聚丙烯酰胺凝胶不凝固?(非忘加试剂,另外试剂是四个小时前配置的,TEMED也进行了避光处理)谢谢前辈们的详细解答。 |
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4楼2012-03-04 19:55:51
starseacow
专家顾问 (职业作家)
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专家经验: +426 - MolEPI: 3
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bolomeer(金币+1):谢谢参与
amisking(金币+5, MolEPI+1): 鼓励积极应助! 2012-03-04 20:19:55
bolomeer(金币+1):谢谢参与
amisking(金币+5, MolEPI+1): 鼓励积极应助! 2012-03-04 20:19:55
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1 我理解楼主所说的10Xloading buffer适用于电泳时用的那种东西,按1/10体积加入样品,具体成分和使用方法最好参考随buffer的说明书。如果是宝生物买的那种,10Xloading buffer含有SDS,可以让taq酶变性,终止反应,另外,10Xloading buffer仅含有溴酚蓝,电泳时与300 bp DNA迁移速度相同。 2 TAE和TBR都是常用的电泳缓冲液,相比较来说,TBE缓冲能力强,适用于长时间电泳,同时分辨能力也高于TAE,对于分离小于1000 bp片段,效果好一些。但TBE不适用于琼脂糖凝胶回收电泳,因为其易与琼脂糖发生反应,影响DNA回收率。此外,TBE离子强度高,对后续反应可能有影响。具体如何选用最好按照相关实验说明书要求。 3 影响胶凝的因素包括:APS失效,温度偏低 如果试剂都没问题,可以考虑多用点TEMED,胶配好后放30度烘箱里,一会就凝了 |
2楼2012-03-04 18:38:18
3楼2012-03-04 19:12:40
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bolomeer(金币+1):谢谢参与
bolomeer(金币+1):谢谢参与
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本帖内容被屏蔽 |
5楼2012-03-05 18:14:28














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