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Protein cytotoxicity assays. To check the putative cytotoxic effects of transferrins or hOtrf peptides, CEF cells were grown to 70% confluency in 96-well plates and were exposed to increasing concentrations of compounds in 2% FCS MEM, from 6 h up to 48 h at 37 C. After Trypan blue staining, viable cells were counted and cell-associated acid phosphatase was dosed using p-nitrophenylphosphate as substrate, according to the Tox-3 kit protocol (Sigma Chemical). |
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释梦110(金币+1):谢谢参与
释梦110(金币+20): 非常感谢！！！ 2012-02-25 15:08:45
西瓜(金币+3): 鼓励应助！辛苦哈~ 2012-02-25 19:05:50
释梦110(金币+1):谢谢参与
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西瓜(金币+3): 鼓励应助！辛苦哈~ 2012-02-25 19:05:50
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试试。不是做细胞的，汗.......还真不是太清楚.....我觉得还是需要高手来修正下... 蛋白质细胞毒性检测。为检测铁传递蛋白或者hOtrf肽可能潜在细胞毒性，把CEF细胞培养在70%铺满的96孔板上并把板子放在含不断升高复合物浓度的2% FCS MEM中，在37度培养6到48个小时。用锥蓝染色以后，数可以看到的细胞数并根据Tox-3 kit protocol (Sigma Chemical)，以对硝基苯酚磷酸盐作为底物，对细胞内酸磷酸酶进行剂量反应（我的理解是浓度梯度处理）。 |
2楼2012-02-25 13:48:56