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zhang8826857

铁杆木虫 (著名写手)

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[求助] 如何把质粒转入大肠杆菌中？

我想把一个质粒转入大肠杆菌中，是直接把大肠杆菌制成感受态细胞，然后把质粒和感受态细胞混合就可以了吗？

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好孩子！

1楼2012-02-20 17:45:29

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_illusion

新虫 (初入文坛)

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【答案】应助回帖

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zhang8826857(金币+3): ★有帮助 2012-02-21 09:24:05

如果有了现成的感受态细胞，可以电转，电转效率比较高...或者KCM 转化...这个浓度较低，效率较低...把两者混合在一起是不可以的....

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3楼2012-02-20 19:42:30

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imyting

至尊木虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

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小丹木木(金币+2): 鼓励应助 2012-02-20 17:58:58
zhang8826857(金币+5): ★有帮助 2012-02-21 09:23:47

一种是自己购买BL21感受态细胞然后按照说明书进行转化，另一种是自己培养BL21空菌，制成感受态细胞，再进行转化。当然了，感受态细胞不止有BL21还有DH5a等，可根据实际情况选用。一般来说，表达的话还是BL21比较好，保存菌种用BL21。转化的方法也不限于上述的Cacl2转化法，还有电转等，但是如果转大肠杆菌的话，Cacl2转化就足够了。

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悠哉游哉做实验，成兮败兮我随便

2楼2012-02-20 17:54:48

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