应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于TAKARA的Ex Taq 酶~
71/1返回列表
查看: 4117  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

沾欢欢

金虫 (正式写手)

啦啦啦

[求助] 关于TAKARA的Ex Taq 酶~

TAKARA的Ex Taq 酶比较适合长片段的模板吗?
我用其做普通PCR,模板长度200 bp左右,扩增出来的结果很奇怪,对照组除了有引物二聚体的条带,也会有大于200bp的条带,有谁知道的,麻烦告诉我,谢谢了~~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-02-17 10:20:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

amilie030312

金虫 (正式写手)
小丹木木(金币+2): 有道理呵 2012-02-17 13:47:22
200bp的片段应该是是个正常的酶都能扩出来的，如果引物没问题，看看是不是GC含量高，那就需要用耐受高GC的酶来扩，如果都没有这些问题就是再普通不过得酶还200就扩不出来，那就赶紧把Takara酶扔了吧。
赞一下 回复此楼
2楼2012-02-17 12:46:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shicaozhu

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
小丹木木(金币+2): 鼓励应助 2012-02-17 13:46:52
以前用这个酶还挺好用的，有其他的杂条带可能是你的水或者PCR管或者枪头有污染。还有就是你的引物可能不对，需要再优化一下。
赞一下 回复此楼
3楼2012-02-17 13:03:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

outlooker09

金虫 (小有名气)
也可能是引物及蛋白浓度比例不合适
赞一下 回复此楼
杨柳岸
4楼2012-02-17 17:48:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ixido

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
wanhscn(金币+2): 鼓励应助！ 2012-02-18 22:44:52
建议楼主先检查一下引物和模板之间的互补情况。
如果是对照组和你的实验组都有非目标条带，可能是引物和模板之间有别的互补区域，产生非特异条带。
如果只是对照组有杂带，那就是有污染了，更换PCR管，枪头和PCR水再看看。
赞一下 回复此楼
5楼2012-02-18 22:42:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiazhiwuxie

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
小丹木木(金币+2): 鼓励应助 2012-02-29 17:16:08
有以下几种可能
1.对照组有污染，把水换掉再试试
2.引物设计有问题，不知道你是什么引物，是特异性还是兼并性的，兼并性引物非常有可能引起单引物扩增
3.EX TAQ酶很好用的，我们实验室一直用这个，大小片段都可以做。
赞一下 回复此楼
6楼2012-02-29 16:23:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

whb21

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
很有可能是你做实验过程中将PCR试剂污染了.....
赞一下 回复此楼
7楼2012-02-29 16:27:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 沾欢欢 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭