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看看这个图,酶切完电泳图
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造血干细胞
铜虫
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帖子: 49
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虫号: 1325909
[交流]
看看这个图,酶切完电泳图
如图,抽提的重组质粒EcoRI/BamHI双酶切,电泳跑出来怎么是这个样子,还是做了两次
下边这个是未酶切的质粒
[
Last edited by 1949stone on 2012-2-16 at 15:59
]
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1楼
2012-02-14 13:41:05
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dorecnu
木虫
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(小学生)
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帖子: 785
在线: 93.3小时
虫号: 448155
★
小木虫(金币+0.5): 给个红包,谢谢回帖
1.质粒提取建议使用高纯度的试剂盒,如果没有条件酚氯仿后务必乙醇沉淀纯化,提取中等拷贝数的质粒,建议菌液OD=1.5左右 4ML提取。
2.检查质粒中的B/E酶切位点,如果位点很多,当然可以理解。
3.检查是否在酶切反应过程中限制性内切酶产生了星号活性?建议A:2ug质粒酶切3小时左右,体系设置成50-100ul.B:采用NEB HF酶,避免星号活性的产生。
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26楼
2012-03-12 12:06:59
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