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[交流]
双酶切问题
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双酶切质粒载体，酶切完全后得到两个片段：约5000bp和100bp，通常回收PCR不容易检测到100bp的条带，这样就不容易区分大片段是双酶切后产物的还是单酶切产物。当然，采用高浓度凝胶可以检测出100bp的条带，不知道还有没有其他简单易行的方法进行区分呢，欢迎指教。 |
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2楼2012-02-07 12:49:58
brightfuture01
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3楼2012-02-07 13:01:21
4楼2012-02-07 13:21:12
5楼2012-02-07 13:44:55
brightfuture01
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7楼2012-02-07 14:17:21
★
joan198108(金币+1):谢谢参与
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| 跑一个单酶切的，跑一个双酶切的，在一个胶上跑，双酶切的比单酶切的要低一点。我用这个方法检测过相差200bp的，没有问题。是不是能多送我金币啊~~ |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
joan1981088楼2012-02-09 09:01:14
9楼2012-02-09 09:33:58
10楼2012-02-09 09:36:23
11楼2012-02-09 10:59:20
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
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我大片段5000bp多，附件1孔mark,2,3孔质粒，4-7双酶切，8-11是对应的双酶切。我的不太明显，你可以胶浓度大一些，电压低一些，跑胶时间长一些。 |
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2012-02-09 15:34:28, 433.05 K
12楼2012-02-09 15:39:21
13楼2012-02-09 15:40:36
14楼2012-02-09 15:56:03
15楼2012-02-09 22:49:48
16楼2012-02-10 08:46:41
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clarktao6楼
2012-02-07 13:52
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joan198108(金币+1):谢谢参与
30