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苹果晒太阳

新虫 (小有名气)

[求助] southern blot 的酶切问题

最近在做southern blot ,用CTAB法大量提取水稻DNA,之后用了好几种常见的酶想将其基因组DNA进行酶切,都没法切完全。降低了酶切DNA的量(之前用50μl 体系,DNA量是根据酶的说明书上的浓度换算的,大概5μl左右,5μl酶。现在将DNA量减至1μl),过夜酶切,第二天补酶再切3小时,仍是无法完全酶切。请各位大侠帮忙分析分析。在下感激不尽!

[ Last edited by 苹果晒太阳 on 2012-1-3 at 15:02 ]
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sunwei57

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
加大体系到400Ul,加40 UL的酶量,酶切24小时后检测没有主条带或弥散条带明显即可,无水乙醇沉淀40UL溶解上样,有时候你很难酶切完全
7楼2012-03-17 11:35:56
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