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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 我提的RNA为什么会这样？
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苯苯兔

银虫 (初入文坛)

[求助] 我提的RNA为什么会这样？

枪头及枪头盒都用DEPC水处理过了，提的时候也注意换手套了，用的是invitrogen公司的TRIZOL,麻烦经验丰富的虫友帮我看一下，为什么没有条带，而末端条带又如此之亮？
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1楼 2012-01-02 22:31:22
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

huakanwei

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+2): 鼓励交流。很多时候会有3条亮带的。 2012-01-04 12:39:33
提的RNA跑电泳出来的条带有两条的是最好，如你所说只有最末端有一个条带，那么就是降解的RNA。如果你的外部条件已经完全按照说明做到位了，那么可以考虑下是你的材料的问题，比如是真菌类的，要考虑到菌丝长到5-7天提RNA是最好，时间过长会导致RNA被内源性降解，不知道你的材料是植物呢还是真菌还是其他？
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10楼2012-01-04 10:42:59
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普通回帖

苯苯兔

银虫 (初入文坛)
上图
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2楼2012-01-02 22:43:47
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苯苯兔

银虫 (初入文坛)
怎么上传不了图片啊
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3楼2012-01-02 22:47:21
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 苯苯兔 at 2012-01-02 22:47:21:
怎么上传不了图片啊

编辑帖子时点击下方的“上传图片”，等图片传好了再发表哦
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4楼2012-01-03 08:34:34
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julietguo

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我最近也出现了类似的问题，相当的烦恼！
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5楼2012-01-03 10:22:57
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花开极致

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木(金币+2): 鼓励应助，欢迎交流 2012-01-03 15:16:53
不同的植物不同的提取方法的，我提的植物中的酚类物质特别的多，用trizol是提不出来的，用的是LiCl的方法，提出来的还是可以，就是这个方法耗时太长。
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享受吧。。。
6楼2012-01-03 11:59:53
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yixinyuan

木虫 (正式写手)
★ ★
小丹木木(金币+2): 鼓励应助，欢迎交流 2012-01-03 15:17:55
得传上图才能分析，大凡RNA降解都因为实验材料没有处理好，内源Rnase酶给RNA降解了。通常我是电动匀浆机破碎组织的，另外都用稍过量的Trizol或者减少组织量的
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7楼2012-01-03 14:21:04
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jjdd55

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
把提出来的RNA稀释下 可以稀释个梯度 5倍 10倍 20倍之类的再跑跑看下
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8楼2012-01-04 00:03:29
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houhoujiayou

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
没有图片，不过你说的末端很亮应该是降解的RNA吧，其实trizol法也不是万能的，我以前一直用它提酵母的RNA死活提不出来，还以为是我自己的问题，后来换做热酚法就做出来了，所以可以考虑其他方法试一下的。再说有的是要有研磨的，如组织之类的，如果不能有效地裂解细胞或组织，那么后面很容易引起降解的。
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9楼2012-01-04 10:29:40
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