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苯苯兔

银虫 (初入文坛)

[求助] 我提的RNA为什么会这样?

枪头及枪头盒都用DEPC水处理过了,提的时候也注意换手套了,用的是invitrogen公司的TRIZOL,麻烦经验丰富的虫友帮我看一下,为什么没有条带,而末端条带又如此之亮?
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huakanwei

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西瓜(金币+2): 鼓励交流。很多时候会有3条亮带的。 2012-01-04 12:39:33
提的RNA跑电泳出来的条带有两条的是最好,如你所说只有最末端有一个条带,那么就是降解的RNA。如果你的外部条件已经完全按照说明做到位了,那么可以考虑下是你的材料的问题,比如是真菌类的,要考虑到菌丝长到5-7天提RNA是最好,时间过长会导致RNA被内源性降解,不知道你的材料是植物呢还是真菌还是其他?
10楼2012-01-04 10:42:59
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普通回帖

苯苯兔

银虫 (初入文坛)

2楼2012-01-02 22:43:47
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苯苯兔

银虫 (初入文坛)

怎么上传不了图片啊
3楼2012-01-02 22:47:21
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 苯苯兔 at 2012-01-02 22:47:21:
怎么上传不了图片啊

编辑帖子时点击下方的“上传图片”,等图片传好了再发表哦
4楼2012-01-03 08:34:34
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julietguo

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我最近也出现了类似的问题,相当的烦恼!
5楼2012-01-03 10:22:57
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花开极致

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木(金币+2): 鼓励应助,欢迎交流 2012-01-03 15:16:53
不同的植物不同的提取方法的,我提的植物中的酚类物质特别的多,用trizol是提不出来的,用的是LiCl的方法,提出来的还是可以,就是这个方法耗时太长。
享受吧。。。
6楼2012-01-03 11:59:53
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yixinyuan

木虫 (正式写手)

★ ★
小丹木木(金币+2): 鼓励应助,欢迎交流 2012-01-03 15:17:55
得传上图才能分析,大凡RNA降解都因为实验材料没有处理好,内源Rnase酶给RNA降解了。通常我是电动匀浆机破碎组织的,另外都用稍过量的Trizol或者减少组织量的
7楼2012-01-03 14:21:04
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jjdd55

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
把提出来的RNA稀释下 可以稀释个梯度 5倍 10倍 20倍之类的再跑跑看下
8楼2012-01-04 00:03:29
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houhoujiayou

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
没有图片,不过你说的末端很亮应该是降解的RNA吧,其实trizol法也不是万能的,我以前一直用它提酵母的RNA死活提不出来,还以为是我自己的问题,后来换做热酚法就做出来了,所以可以考虑其他方法试一下的。再说有的是要有研磨的,如组织之类的,如果不能有效地裂解细胞或组织,那么后面很容易引起降解的。
9楼2012-01-04 10:29:40
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