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吴德光

禁虫 (小有名气)

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留级生2005

铁杆木虫 (著名写手)

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感谢参与,应助指数 +1
tuobaohua(金币+1): 依旧积极,BB有的是! 2011-12-28 08:34:47
醋酸锂法转化巴氏毕赤酵母表达人核心蛋白聚糖(DCN)。方法将重组体pPic9k-DCN经BglⅡ酶切线性化,通过醋酸锂法转入酵母宿主HIS-/GS115细胞中,然后在含不同浓度G418的YPD平板上筛选阳性克隆;用含1%甲醇的BMMY培养基诱导表达该蛋白;并观察表达产物对HepG2细胞生长的影响。请参考--
摘自《山西医药杂志》 2010年05期
用醋酸锂法转化巴氏毕赤酵母表达人核心蛋白聚糖
郝小夏

希望对你有用!!
2楼2011-12-27 21:18:38
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鱼成双

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
吴德光: 金币+10, 有帮助, 谢谢,希望下次能再得到你的帮助 2012-05-03 17:09:20
用醋酸锂转化要注意几点:
一,线性化的质粒要足够多10ug~20ug
二,线性化后的片段要尽可能去掉其他盐离子,可先清洁回收,然后再乙醇沉淀
三,可用DTT(二硫苏糖醇)处理感受态细胞提高转化效率

祝你好运

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

3楼2012-05-01 21:39:19
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吴德光

禁虫 (小有名气)

送鲜花一朵
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4楼2012-05-09 15:51:03
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