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liuyu_sdili

木虫 (正式写手)

[求助] 新手求助——质粒电泳条带问题

电泳图谱解释:第一泳道为1Kb DNA ladder marker,后面四个为pUC19,最后五个为一个9000bp的质粒,请问pUC19为什么会出现多个条带,我看过相关的资料,觉得第一个应该是超螺旋,后面的一个是开环的,那后面的应该是什么?我想做酶切连接,请问会不会有什么不利影响?为什么9000bp的那个质粒为什么不会出现这种情况啊?电泳条件:上样5uL,电压100V,时间40min,1%琼脂糖。请多多赐教~~~

电泳图谱

[ Last edited by silicare on 2014-2-17 at 11:59 ]
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longrna

新虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 5xiaosh at 2011-12-21 11:43:16:
继续往下做,应该没问题的。你那个9带的质粒我看Marker怎么在6kb的位置呢?

质粒为环状,Marker为线性DNA(跑得慢一些),跑的位置有差异。
伟大航线....
10楼2011-12-22 09:49:05
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查看全部 16 个回答

guangxidaxue

金虫 (小有名气)

无图无真相!但是大肠杆菌提取的质粒三条带是很正常,基本不会影响实验的
3楼2011-12-20 22:33:19
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
liuyu_sdili(金币+2): ★★★很有帮助 确实是,我酶切后就只有一个条带了~~~ 2011-12-21 18:39:04
没有单酶切去跑质粒说明不了问题。
4楼2011-12-20 22:34:50
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shaquila

金虫 (正式写手)


1949stone(金币+1): 暴力 哈哈 2011-12-20 23:53:32
其实提质粒没啥好说,只要不要太暴力,两三条带很正常,超螺旋是大部份,不会影响后续步骤
5楼2011-12-20 22:56:09
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