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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药代动力学 » 血样经沉淀处理，离心后可以直接进LC-MS吗？
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爱予橙

金虫 (小有名气)

[求助] 血样经沉淀处理，离心后可以直接进LC-MS吗？ 已有1人参与

本人处理血样方法是：3倍甲醇沉淀，15000转10min离心2次，然后进LC-MS。
最近发现LC-MS柱压很高，怀疑可能是柱子被堵了，是不是血浆中蛋白处理不充分呢，难道离心后还需要过滤膜么？
求高人解惑，不胜感激～～
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1楼 2011-12-20 16:47:03
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巧克力幸运星

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
豆哥(金币+1): 感谢参与交流，欢迎常来药学版。 2011-12-22 11:42:05
LC-MS/MS对溶剂的要求比HPLC要高，一般采用蛋白沉淀法处理的样品是不能进液质的，最好采用液液萃取的方法，这样得到的回收率还高!

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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用心专一才是生活真正的态度！
2楼2011-12-21 13:09:36
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kkbyb

木虫 (著名写手)
采用色谱纯甲醇或更换乙腈。您离心是一个管子离两次还是离一次转移后再离一次？
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爱予橙
3楼2011-12-21 15:44:44
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爱予橙

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 巧克力幸运星 at 2011-12-21 13:09:36:
LC-MS/MS对溶剂的要求比HPLC要高，一般采用蛋白沉淀法处理的样品是不能进液质的，最好采用液液萃取的方法，这样得到的回收率还高!
[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]

沉淀法不是比较简单嘛～
我有加预柱的，应该还好吧？
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4楼2011-12-22 09:56:51
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爱予橙

金虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by kkbyb at 2011-12-21 15:44:44:
采用色谱纯甲醇或更换乙腈。您离心是一个管子离两次还是离一次转移后再离一次？

是离一次转移后再离一次，我用的就是色谱醇的甲醇。

高人啊～乙腈会比甲醇好吗？
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5楼2011-12-22 09:58:28
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kkbyb

木虫 (著名写手)
★
豆哥(金币+1): 感谢参与交流，欢迎常来药学版。 2011-12-22 11:42:30
甲醇沉淀为颗粒状内原物质，乙腈为胶态状，普遍认为沉淀效果来说乙腈优于甲醇，但也得根据你的提取回收率去定。你写的处理方式没问题，我们也是这么做，还是1.7u的柱子呢，一直没问题。
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6楼2011-12-22 11:02:50
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hyfwkd

铜虫 (初入文坛)
★
豆哥(金币+1): 感谢参与交流，欢迎常来药学版。 2011-12-22 11:42:36
完全可以，我们离心只需5min，15000rpm，一次就够了，不过沉淀一般用ACN，甲醇偶尔也用，我个人认为跟这个离心是没有关系的，这么多年和这么多台仪器，柱子都没事，所以你能不能给个详细的情况，包括流动性，柱子型号什么的，等等
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7楼2011-12-22 11:16:00
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爱予橙

金虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by hyfwkd at 2011-12-22 11:16:00:
完全可以，我们离心只需5min，15000rpm，一次就够了，不过沉淀一般用ACN，甲醇偶尔也用，我个人认为跟这个离心是没有关系的，这么多年和这么多台仪器，柱子都没事，所以你能不能给个详细的情况，包括流动性，柱子 ...

哦  我的流动相一般是甲醇或乙腈+醋酸铵缓冲盐，柱子是：Agilent C18 4.6x250mm，5um。
如果用ACN沉淀的话，工作液用甲醇溶解的会不会有影响啊？
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8楼2011-12-22 16:43:37
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爱予橙

金虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by kkbyb at 2011-12-22 11:02:50:
甲醇沉淀为颗粒状内原物质，乙腈为胶态状，普遍认为沉淀效果来说乙腈优于甲醇，但也得根据你的提取回收率去定。你写的处理方式没问题，我们也是这么做，还是1.7u的柱子呢，一直没问题。

嗯～  那应该是没问题了～  谢谢啊～～
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9楼2011-12-22 16:44:32
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zhuhev

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
豆哥(金币+1): 感谢参与交流，欢迎常来药学版。 2011-12-24 14:11:43
可以直接进样，但色谱柱前要加一个预柱，否者色谱柱容易堵。沉淀后直接进样样品处理时间短，是我的最爱。。。
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10楼2011-12-24 13:21:50
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