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小珍珍

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助】HPLC血样预处理后的浓度计算 已有4人参与

第一种
血浆样品预处理川取健康志愿者血浆样品250uL、0.04g/L内标溶液50uL、100g/L抗坏血酸溶液100uL,旋涡混合10s,加入18%高氯酸溶液100uL,旋涡振荡1min,8000r/min离心10min,吸取上清液20uL进样分析。
第二种
40ug/mL标准液烘干,再溶于250uL空白血浆,然后加0.04g/L内标溶液50uL、100g/L抗坏血酸溶液100uL,旋涡混合10s,加入18%高氯酸溶液100uL,旋涡振荡1min,8000r/min离心10min,吸取上清液20uL进样分析。

第一种提到的血浆是给药后取的血浆  那么在做标准曲线时应该怎么设计啊?要加内标吗 ?  标准品是不是必须得先配好浓度再烘干, 然后再溶于血浆啊?
我设计了第二种  请教一下大家对吗?最后上清液的药物浓度是多少啊 ?怎么计算啊?

[ Last edited by 小珍珍 on 2010-5-14 at 17:39 ]
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xuwen78

禁虫 (小有名气)

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xiaodu2007693(金币+1):谢谢交流 2010-05-14 19:07:57
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2楼2010-05-14 18:37:42
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小珍珍

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by xuwen78 at 2010-05-14 18:37:42:
上述设计是可以的,按上述方法血浆样品的浓度就是:
(标准溶液体积/空白血浆体积)*标准溶液浓度
其实标准溶液挥不挥干都行,如果不挥干,在血浆样品中加入同样体积的溶剂就行

“如果不挥干,在血浆样品中加入同样体积的溶剂就行”这句话没懂哦,是不是如果挥干,在血浆样品中加入同样体积的溶剂就行
刚好反了?
3楼2010-05-14 19:51:16
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xuwen78

禁虫 (小有名气)


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4楼2010-05-15 11:04:22
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susan880917

新虫 (初入文坛)

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xiaoxiao270(金币+1): 3Q 2012-02-10 16:44:03
有没有不用高氯酸的方法?用有机溶剂沉淀的,最好是乙腈~~
5楼2012-02-10 11:45:02
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樱桃_0119

金虫 (小有名气)

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xiaoxiao270(金币+1): 3Q 2012-02-10 16:44:10
标准溶液烘干的话,是否还要考虑烘干条件及物质稳定性呢?
6楼2012-02-10 13:13:23
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