应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药代动力学 » 血样经沉淀处理，离心后可以直接进LC-MS吗？
242/3返回列表上一页123下一页
查看: 4211  |  回复: 23
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

天风海韵

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
karl2100(金币+1): 3Q 2011-12-28 23:55:33
可以涡旋后放4℃冰箱冻半个小时后再离心取上清进样，会比较干净
赞一下(1人) 回复此楼
11楼2011-12-28 22:53:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

爱予橙

金虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by 天风海韵 at 2011-12-28 22:53:23:
可以涡旋后放4℃冰箱冻半个小时后再离心取上清进样，会比较干净

这是为什么呢？每次都冻半小时岂不是很费时间的啊？
赞一下 回复此楼
12楼2011-12-29 15:06:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天风海韵

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 爱予橙 at 2011-12-29 15:06:29:
这是为什么呢？每次都冻半小时岂不是很费时间的啊？

低温下使蛋白沉淀得更完全，上清液干净，不容易堵柱子，时间上样品少样品多都差不多的，你在冻的时候可以继续处理下一批样品吧
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

爱予橙
13楼2011-12-29 18:15:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

爱予橙

金虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
楼: Originally posted by 天风海韵 at 2011-12-29 18:15:53:
低温下使蛋白沉淀得更完全，上清液干净，不容易堵柱子，时间上样品少样品多都差不多的，你在冻的时候可以继续处理下一批样品吧

哦，好的～ 谢谢啊～～
赞一下 回复此楼
14楼2011-12-31 11:17:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rr.elijar

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 天风海韵 at 2011-12-28 22:53:23
可以涡旋后放4℃冰箱冻半个小时后再离心取上清进样，会比较干净

我想问一下，我们没有半小时放冰箱，一直都是直接进柱子，现在发现柱压越来越高，不知道你们情况如何？
赞一下 回复此楼
15楼2012-11-09 18:50:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zlfok00

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
karl2100: 金币+1, 谢谢！ 2013-02-17 22:39:22
具体血浆处理方法要依据各方法的回收率和基质效应大小而定。沉淀剂均采用色谱纯，沉淀后离心一次即可，离心后过针头滤器，之后才可以进样检测，生物样品脏的很，不过滤头不仅对色谱柱不好，质谱系统也是较易污染的，而且清洗起来比较复杂。
赞一下 回复此楼
16楼2012-11-09 20:58:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

staffyujay

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

3倍乙腈5倍甲醇？建议有条件还是液液萃取或者固相萃取柱，沉淀蛋白进样品总感觉伤质谱的很啊
赞一下 回复此楼
17楼2013-02-05 16:58:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shex

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
karl2100: 金币+1, 多谢提供！ 2013-02-17 22:39:34
处理方法应该可以，我们也是这样做的，更主要的是看回收率怎么高。沉淀和萃取都行，前面都说了。但还有一点可能没注意，你的流动相梯度如何，对样品的溶解度怎么样。按你的方法，最后的样品中相当于甲醇>75%，有机相比例很高，自然样品溶的好，但流动相的初始梯度不大可能真么高，样品成份会在柱头析出，特别是有盐的情况。还有就是高保留的成分是否全部洗脱，若沉积在柱子里也会随着进样柱压越来越高。
赞一下 回复此楼
18楼2013-02-17 10:17:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangsophia21

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

这么做肯定是可以的，也有很多实验室在用，但肯定是对色谱柱、离子源有一定的影响。
有些方面也是要注意：
1. 沉淀的溶剂和体积比。有篇文献专门研究不同的沉淀剂对血浆蛋白沉淀的效果（你可以上网查查），乙腈是要好过甲醇，而且体积比至少是3:1。4度放置、4度高速离心，也有利于提高沉淀效果。
     色谱柱尽量不要用超高压的，如1.8um，压力会上的很快。我们曾经乙酸乙酯提取的样品，1.8um的柱子的压力很快升上去了。
      尽量使用预柱
      上过血浆直接沉淀样品的色谱柱，切记冲洗时不要用高比例的有机相（如70%以上），会加速柱压上升。（据分析是因为将截留在柱头的蛋白再次变性，相当于第二次蛋白沉淀，形成致密层。
2. 色谱峰的峰形。  当进样的样品中所含的有机相比例，高于流动相中的有机相比例时，色谱峰就会变宽、胖。这点你可以试试，很明显。（当然，你也可以通过设定梯度洗脱来改善峰形）
3. 对喷雾针、离子源挡板的影响。
连续测定直接沉淀的样品后，观察喷雾针和离子源的挡板，就可以看到上面有焦黑的一层。（当然，可以通过超声和清洗，除去。），短期对测定似乎没有明显影响。
所以，如果你的质谱有切换阀，建议将前面的（如1-2min左右的）的流出物to wast，这样喷雾针和挡板就会干净很多。
暂时想到这些。
赞一下 回复此楼
珍惜人生
19楼2013-02-27 17:25:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

眸中流逝

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

可以直接进  但是我们用乙腈一般是三倍体积沉淀，甲醇一般是四倍体积沉淀  不知道这个有没有关系
赞一下 回复此楼
20楼2013-03-01 09:45:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 爱予橙 的主题更新
242/3返回列表上一页123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +11 koalala 2026-08-24 13/650 2026-08-24 10:49 by anjeeshine
[基金申请] 让我中一个面上吧！ +13 大萍1987 2026-08-20 16/800 2026-08-24 10:23 by 太傻了
[基金申请] 明天应该可查了！？ +4 chengyan1220 2026-08-23 4/200 2026-08-24 08:47 by gloomy6159
[基金申请] 什么时候开奖？ +10 CrisMessi 2026-08-18 11/550 2026-08-24 06:50 by 开心的小狮子
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +16 羊腰板 2026-08-21 17/850 2026-08-23 23:02 by tianxiaochun
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +4 process2012 2026-08-23 5/250 2026-08-23 19:58 by jurkat.1640
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +7 且听虎啸 2026-08-17 8/400 2026-08-22 21:55 by 医学老男孩
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +13 ziyangfang 2026-08-19 16/800 2026-08-22 17:08 by WH3796
[基金申请] 人气不行了 +8 fansofjerry 2026-08-21 8/400 2026-08-22 16:30 by zyqchem
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 看来今天不会放榜了？ +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧？ +4 哈哈蛤？ 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 明天放榜？ +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭