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爱予橙

金虫 (小有名气)

[求助] 血样经沉淀处理,离心后可以直接进LC-MS吗? 已有1人参与

本人处理血样方法是:3倍甲醇沉淀,15000转10min离心2次,然后进LC-MS。
最近发现LC-MS柱压很高,怀疑可能是柱子被堵了,是不是血浆中蛋白处理不充分呢,难道离心后还需要过滤膜么?
求高人解惑,不胜感激~~
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爱予橙

金虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by hyfwkd at 2011-12-22 11:16:00:
完全可以,我们离心只需5min,15000rpm,一次就够了,不过沉淀一般用ACN,甲醇偶尔也用,我个人认为跟这个离心是没有关系的,这么多年和这么多台仪器,柱子都没事,所以你能不能给个详细的情况,包括流动性,柱子 ...

哦  我的流动相一般是甲醇或乙腈+醋酸铵缓冲盐,柱子是:Agilent C18 4.6x250mm,5um。
如果用ACN沉淀的话,工作液用甲醇溶解的会不会有影响啊?
8楼2011-12-22 16:43:37
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巧克力幸运星

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
豆哥(金币+1): 感谢参与交流,欢迎常来药学版。 2011-12-22 11:42:05
LC-MS/MS对溶剂的要求比HPLC要高,一般采用蛋白沉淀法处理的样品是不能进液质的,最好采用液液萃取的方法,这样得到的回收率还高!

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
用心专一才是生活真正的态度!
2楼2011-12-21 13:09:36
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kkbyb

木虫 (著名写手)

采用色谱纯甲醇或更换乙腈。您离心是一个管子离两次还是离一次转移后再离一次?

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

3楼2011-12-21 15:44:44
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爱予橙

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 巧克力幸运星 at 2011-12-21 13:09:36:
LC-MS/MS对溶剂的要求比HPLC要高,一般采用蛋白沉淀法处理的样品是不能进液质的,最好采用液液萃取的方法,这样得到的回收率还高!
[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]

沉淀法不是比较简单嘛~
我有加预柱的,应该还好吧?
4楼2011-12-22 09:56:51
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