| 查看: 3357 | 回复: 11 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
求助高手，我用手提的土壤DNA，用什么方法纯化
|
||
| 我用手提的土壤总DNA，之前用过切胶回收，但是切胶回收的产物做PCR效果不好。用soilmaster DNA 纯化效果还不错，但是再买说已经停产了，不知道有没有其他好的纯化方法，求高手指教~~~ |
回复此楼» 猜你喜欢
售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急
已经有4人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急
已经有4人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急
已经有4人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急
已经有4人回复
-
2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件，有关系吗？
已经有20人回复
-
今天务委会开完了，明天出结果吗
已经有22人回复
-
在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。
已经有9人回复
-
明天应该可查了！？
已经有6人回复
-
有没有大神帮我看看基金代码
已经有10人回复
-
放榜前的不淡定
已经有19人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 细菌基因组DNA的纯化方法？
已经有5人回复
- 土壤总DNA提取步骤中，加入异丙醇后，静置，出现分层，求助高手
已经有13人回复
- 【求助/交流】土壤总DNA的离心柱纯化问题
已经有15人回复
- 【求助/交流】DNA提取纯化
已经有24人回复
- 【求助/交流】土壤DNA提取及PCR
已经有20人回复
- 【求助/交流】DNA提取 纯化 稀释 资料
已经有5人回复
- 【求助/交流】求助国产品牌DNA纯化试剂盒
已经有3人回复
- 【求助/交流】DNA纯化问题
已经有23人回复
- 【求助/交流】求助-苯酚氯仿纯化DNA方法
已经有12人回复
- 【求助/交流】请教基因组的纯化方法。
已经有5人回复
- 【求助/交流】请教DNA提取高手，什么试剂能使土壤中的细胞分散于溶液中？
已经有11人回复
感谢参与，应助指数 +1
amisking(应助指数-1): 2011-12-18 17:56:52
amisking:编辑内容 2011-12-18 17:57
amisking(应助指数-1): 2011-12-18 17:56:52
amisking:编辑内容 2011-12-18 17:57
 本帖仅楼主可见 |
3楼2011-12-18 12:21:21
yaoyl0679
金虫 (正式写手)
- 应助: 7 (幼儿园)
- 金币: 1368.9
- 散金: 1025
- 红花: 1
- 帖子: 599
- 在线: 175小时
- 虫号: 263608
- 注册: 2006-07-02
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
2楼2011-12-18 11:36:52
4楼2011-12-18 20:46:03
【答案】应助回帖
★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857(金币+3): good 2011-12-19 09:49:23
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857(金币+3): good 2011-12-19 09:49:23
|
方法我给你，我自己总结用电子天平分别称取土样各3g于磨口三角烧瓶内 用移液枪分别移取6mLDNA提取液加入到三角烧瓶内 从冰箱中取出蛋白酶K和溶菌酶放在手心焐热至溶化 用移液枪分别移取500uL和20uL溶菌酶和蛋白酶K于三角烧瓶内，然后塞上空心塞置于37℃恒温摇床上振荡30min，然后取出置于37℃恒温水浴锅内水浴1小时。 待水浴结束后分别加入1mL20%的SDS溶液，再将其置于65℃恒温水浴锅内水浴2小时 待水浴结束后，取出分别加入2.51mL的6mol/L的氯化钠溶液剧烈振荡，倒入离心管12000r/min离心15分钟 取上清液将其分成3分每份均取0.4mL置于灭过菌的离心管内，然后加入0.4mL的苯酚：氯仿：异戊醇=25：24：1的溶液，然后12000r/min离心5分钟 离心后取上清液加入等体积的氯仿：异丙醇=24：1的溶液然后置于离心机12000r/min离心5分钟 取出上清液加入2倍提及的无水乙醇室温下沉淀20~30分钟 待沉淀完12000r/min离心10分钟 弃去上清液加入200uL的TE缓冲液使沉淀溶解 放置在-20℃冰箱保存出来的，效果还不错的！方法步骤如下： |
5楼2011-12-18 22:18:23
