| 查看: 4830 | 回复: 8 | ||||
| 本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | ||||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||||
[求助]
新手提RNA，请教几个问题
|
||||
|
小鼠脾细胞，用试剂盒提的RNA，提了两次结果都差不多，所有器皿我都已经处理过了，这是降解的很严重吗？ 1，整个提取过程需要在冰上进行吗？试剂盒说明书上并没有明确提到 2. 整个操作过程大概保证在多长时间内完成？因为第一次提，过程很不熟练，我觉得整个操作有点慢 3. 如何能避免基因组DNA污染？第一步裂解细胞试剂盒protocol写充分震荡，怎么掌握强度？过于剧烈会不会造成基因组DNA断裂？  |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 实验技术 | 【分子生物】EPI帖 |
» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有181人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 关于RNA提取的问题
已经有8人回复
- 提RNA时样品取材的问题？
已经有4人回复
- 拟南芥RNA提取问题
已经有13人回复
- 【求助/交流】植物中RNA提取的问题
已经有13人回复
- 【求助】冰冻组织RNA提取相关问题
已经有5人回复
- 【求助/交流】水稻叶片RNA提取问题
已经有15人回复
- 【求助/交流】刚提的RNA检测问题
已经有13人回复
- 【求助/交流】关于提取RNA所用枪头的处理问题
已经有26人回复
- 【求助/交流】trizol 提ＲＮＡ中的一些问题
已经有24人回复
- 【求助/交流】求助高手-棉花中RNA提取质量验证及反转后cDNA质量验证问题
已经有13人回复
- 【求助/交流】RNA的提取问题和qRT-PCR分析基因在不同时间的定量表达
已经有10人回复
- 有关RNA提取的问题
已经有12人回复
wanghd2826
铁虫 (小有名气)
- MolEPI: 1
- 应助: 16 (小学生)
- 金币: 33
- 散金: 130
- 帖子: 128
- 在线: 36.9小时
- 虫号: 1316229
- 注册: 2011-06-06
- 性别: GG
- 专业: 森林生物学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wanhscn(金币+5): 鼓励新虫友积极应助！望再接再励！ 2011-12-19 16:43:39
ln031101(金币+5): 太感谢了！ 2011-12-19 21:55:59
感谢参与，应助指数 +1
wanhscn(金币+5): 鼓励新虫友积极应助！望再接再励！ 2011-12-19 16:43:39
ln031101(金币+5): 太感谢了！ 2011-12-19 21:55:59
|
总体来说，效果不佳（不过你第一次提能得到这样的效果已经很不错了），最后两条泳道的用DNA酶处理下还能做一般的RT-PCR，以下是我提RNA的建议和一点经验： 1、整个过程尽量在冰上进行。 2、最好用规划过的枪头和离心管，不是很贵。如果为了省钱，那得用0.1%的DEPC水过夜处理，再高压灭菌，因为DEPC非常危险，所以这点钱最好别省。 3、速度尽量快，但不要心急，因为无论怎样RNA都会降解。 4、研磨是关键，最好用液氮，研磨到细粉状。 5、点样孔很亮，说明有蛋白质污染，可能是在取上清的过程中吸多了，不要贪多，够用即可。 |
7楼2011-12-19 15:57:42
starseacow
专家顾问 (职业作家)
-
专家经验: +426 - MolEPI: 3
- 应助: 1217 (讲师)
- 金币: 9097.3
- 散金: 16445
- 红花: 226
- 帖子: 4669
- 在线: 2320.2小时
- 虫号: 1136974
- 注册: 2010-11-02
- 性别: GG
- 专业: 植物生理与生化
- 管辖: 动植物
2楼2011-12-18 04:36:03
shaquila
金虫 (正式写手)
- MolEPI: 5
- 应助: 37 (小学生)
- 金币: 1484.8
- 散金: 59
- 红花: 14
- 帖子: 553
- 在线: 182.3小时
- 虫号: 654839
- 注册: 2008-11-15
- 专业: 生物大分子结构与功能
3楼2011-12-18 08:50:59
4楼2011-12-18 11:01:23
20
投票:
