应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 新手提RNA，请教几个问题
51/1返回列表
查看: 4815  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

ln031101

铜虫 (小有名气)

[求助] 新手提RNA，请教几个问题

小鼠脾细胞，用试剂盒提的RNA，提了两次结果都差不多，所有器皿我都已经处理过了，这是降解的很严重吗？
1，整个提取过程需要在冰上进行吗？试剂盒说明书上并没有明确提到
2.  整个操作过程大概保证在多长时间内完成？因为第一次提，过程很不熟练，我觉得整个操作有点慢
3.  如何能避免基因组DNA污染？第一步裂解细胞试剂盒protocol写充分震荡，怎么掌握强度？过于剧烈会不会造成基因组DNA断裂？
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

实验技术 【分子生物】EPI帖

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-12-17 21:24:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ln031101

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by starseacow at 2011-12-18 04:36:03:
提的效果不佳，点样孔附近很亮，怀疑有DNA污染
1 按说明来，不过我觉得在冰上做比较好
2 肯定是越快越好，但只要你不是慢得离谱，我觉得提取时间只可能影响结果好坏而非有无。
3 DNA污染部分，酚氯仿抽提吸上清 ...

那在泳道前面那部分弥散状的时降解的RNA还是别的什么？？
赞一下 回复此楼
4楼2011-12-18 11:01:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
ln031101(金币+3): 谢谢！！ 2011-12-18 10:59:49
提的效果不佳，点样孔附近很亮，怀疑有DNA污染
1 按说明来，不过我觉得在冰上做比较好
2 肯定是越快越好，但只要你不是慢得离谱，我觉得提取时间只可能影响结果好坏而非有无。
3 DNA污染部分，酚氯仿抽提吸上清这一步，少吸点会有帮助。如果污染仍很严重，可以用无RNA酶活性的DNA酶处理。
赞一下 回复此楼
植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
2楼2011-12-18 04:36:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shaquila

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
ln031101(金币+3): 谢谢！！ 2011-12-18 11:01:38
我觉得是不是你样品保存的问题，我不是做动物的。但是取样后应该马上液氮速冻后放负80。不知道你用什么盒子，是否液氮研磨，其他操作一般都要在rt，低温可能导致裂解液效果不佳。
赞一下 回复此楼
3楼2011-12-18 08:50:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ln031101

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by shaquila at 2011-12-18 08:50:59:
我觉得是不是你样品保存的问题，我不是做动物的。但是取样后应该马上液氮速冻后放负80。不知道你用什么盒子，是否液氮研磨，其他操作一般都要在rt，低温可能导致裂解液效果不佳。

我是将小鼠脾细胞分离出来，药物处理几个小时，然后提的RNA，不知道在这个过程中对细胞RNA有没有影响？
赞一下 回复此楼
5楼2011-12-18 11:02:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 4/200 2026-08-29 04:18 by gy1nBQXYQJqL
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 4/200 2026-08-29 03:58 by gy1nBQXYQJqL
[博后之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 3/150 2026-08-29 03:23 by gy1nBQXYQJqL
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的？ +16 爱看书的可乐 2026-08-26 18/900 2026-08-29 00:28 by winsaint
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +13 晴天加油 2026-08-26 14/700 2026-08-28 18:36 by huagongfeihu
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +3 德尚中行 2026-08-27 3/150 2026-08-28 15:24 by rongshuxia
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +3 bud_bud 2026-08-27 6/300 2026-08-28 11:53 by bud_bud
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 基金未中，这种答复是模板吗？ +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[文学芳草园] 梦想 +3 myrtle 2026-08-26 3/150 2026-08-27 10:01 by angelyueyi
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜？ 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 我不理解！ +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[职场人生] 学生撞见辅导员送外卖，第二天全班都沉默了 +3 鲸鱼融金_浙江_� 2026-08-22 3/150 2026-08-26 09:01 by zzuzxg
[基金申请] 国合现在查不到了吗？ +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 明天应该可查了！？ +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
[基金申请] 某些机构，以效率低为荣，以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭