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爱予橙

金虫 (小有名气)

[求助] 求助:100%甲醇做流动相,出峰仍然很晚;样品溶剂不一样,出峰时间也不一样?

求助各位大侠:
    现有一样品,甲醇难溶,丙酮易溶,乙醇能溶。
    摸索方法好久,发现100%甲醇才能冲出样品。  在此色谱条件下:
    我先用丙酮溶解样品,加甲醇稀释,进样,5min出峰;
        后又用乙醇溶解,进样,15min出峰,而且峰形相当拖。
     从结构上推,该样品极性也不是很弱的。

   还请各位老师指教,我要怎样才能走出正常的峰形啊~~~
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wangfei.ac

铁杆木虫 (正式写手)


【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
jiangchunyong(金币+1): 谢谢 2011-12-15 16:45:21
“我先用丙酮溶解样品,加甲醇稀释,进样,5min出峰”
这5min的峰很可能是丙酮溶剂(UVmax = 268 nm),去核实看看是不是?
2楼2011-12-15 16:40:03
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
novus(金币+1): thanks! 2011-12-15 21:13:25
引用回帖:
样品溶剂不一样,出峰时间也不一样

溶剂即使对样品保留时间存在影响,但也只是轻微的。5min与15min,太不靠谱了吧?有进空白(进样前溶解样品所用的溶剂空白)吗?

要改善峰型,可选择:流动相比例、缓冲盐、流动相pH、柱温,控制。
守候在风中的宁静。
3楼2011-12-15 16:50:46
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xiaoxiao270

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
novus(金币+1): 谢谢交流! 2011-12-15 21:13:53
你确定你样品有紫外吸收吗,没准是你甲醇把柱子里的脏东西带下来了
分离、分离
4楼2011-12-15 17:54:15
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lslcpu

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xiaoxiao270(金币+1): 谢谢 2011-12-15 21:17:23
这些问题请说明几点?
1)柱子类型
2)空白进针
3)流动相组成?
4)样品溶剂等
不然不好分析啊!
一山还有一山高
5楼2011-12-15 20:13:27
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zhangsh168

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
leecius(金币+1): 谢谢。 2011-12-16 08:08:59
换流动相 可能会有效果
6楼2011-12-15 20:26:51
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zyxme

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
leecius(金币+1): 谢谢帮助。 2011-12-16 08:08:40
溶剂对出峰时间的影响是轻微的,不会有十分钟之差,进一针空白看一下
7楼2011-12-16 02:59:24
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betterflower

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
leecius(金币+1): 谢谢。 2011-12-16 08:08:47
你换个相反极性的柱子测一下啊

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

8楼2011-12-16 07:57:48
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爱予橙

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wangfei.ac at 2011-12-15 16:40:03:
“我先用丙酮溶解样品,加甲醇稀释,进样,5min出峰”
这5min的峰很可能是丙酮溶剂(UVmax = 268 nm),去核实看看是不是?

先谢谢您的回帖,
丙酮在2min出峰的,我是在LU-MS上做的,所以5min出的物质可以断定是样品,但峰形很拖~
9楼2011-12-16 12:14:09
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爱予橙

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 痴夷子皮 at 2011-12-15 16:50:46:
溶剂即使对样品保留时间存在影响,但也只是轻微的。5min与15min,太不靠谱了吧?有进空白(进样前溶解样品所用的溶剂空白)吗?

要改善峰型,可选择:流动相比例、缓冲盐、流动相pH、柱温,控制。

空白没进,不过我做的是LC-MS 所以峰归属应该没问题,只过了几天,同条件进样就不重现成这样,我再跑跑试试,看出峰时间还变不了。

现在的条件是100%的甲醇,这还能怎么优化呢?
10楼2011-12-16 12:19:09
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